CIK细胞培养0、4、7、10、14天分别是什么样的？

momoenn

回复 ganggangtry100 的帖子! L6 S' W0 }8 J6 P
: ~2 @" |& d, N2 S7 A  Z; ]0 h
我们用的X-VIVO15  加的因子是IFN-r ，CD3和IL-2。加培养基是看细胞状态加。有没有可能是我们的因子效价不够呢

ganggangtry100

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! W: L# F8 K8 r9 `2 c" `" q2 \$ S
$ T  v0 A' H' yX-VIVO15  很好的培养基，你们CD3+细胞比较多，CD3抗体应该没有问题，看看IL-2和IFN-r在因子配置、保存上是否有失活（配置浓缩液-20度保存，平时工作液4度存放）可以尝试提高浓度或者三种因子一直添加，如果NKT还上不去，不要犹豫，换因子厂家吧~~~

momoenn

( ]+ e. ]( s8 c% k  B# M2 @" F: S3 H/ L2 ]3 u8 K* J
回复 ganggangtry100 的帖子2 M' g9 S' H2 B$ z) V5 V

6 R' Q3 ~4 v2 m' W$ P2 p( k1 A9 MIL-2失活的可能性很小，IFN-r和你说的保存方法一样。IFN-r一直添加的话，不会对细胞造成杀伤吗？如果可以的话，能不能试下请教一下.先谢下了

地球外世界

回复 wuhuaguo88l 的帖子+ l2 l# o2 P2 X

- a& a2 l% w- Q% v) \2 _  p9 H5 p谢谢

地球外世界

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5 {5 t- a+ H6 E) ]: F8 y! N, ?7 d% l
  h; n5 d8 L. u( I非常感谢，培养阶段描述很详细，我再好好观察记录，观察是否与您的结果映照。

地球外世界

回复 zhengjianwei521 的帖子
8 w$ Z+ K, r# A0 X
" {% a- ?  t$ f- b* U9 b嗯，好的  \/ N1 A% [( G, p3 a* T# s6 p. `

地球外世界

回复 ganggangtry100 的帖子0 r* a+ c& u1 P9 x

% \9 X# [3 U5 b嗯，好的，现在用的是GT551培养基，用至少提前一天CD3和其他因子先包被培养瓶，再进行细胞培养，后期补加白细胞介素。这样培养，细胞增殖还是很慢，还在找原因。您觉得问题会出现在哪里呢？

ganggangtry100

回复 地球外世界 的帖子$ l  w6 u1 a! e. O2 p3 P* V3 \" v7 a

# j1 ~$ }$ k9 I% Z  i7 Z. a  CIK培养基中如果细胞生长慢，主要关注CD3和 IL-2的问题，他们两个是刺激细胞活化和和增殖作用，rIFN-γ等主要是增加细胞杀生活性的。
6 i' L% C( J& ?, x. J8 m# o   看看包被浓度和白细胞介素的量是否够或失活，如果足量，只要他们两个因子，用1640细胞都能很好的增殖。

ganggangtry100

回复 momoenn 的帖子* S  Q  Z, |0 w' ^

* k3 z! b9 s2 k! Y6 t  CIK培养基中如果细胞生长慢，主要关注CD3和 IL-2的问题，他们两个是刺激细胞活化和和增殖作用，rIFN-γ等主要是增加细胞杀瘤活性的。3 y0 p4 A: @5 a. X4 l
   CIK本身也可以分泌rIFN-γ，个人认为不会对细胞造成不良影响。只是我的建议，各个实验室都有不同的培养方案，可以尝试一下。

地球外世界

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' A# x$ W! t! v
1 C" ^, M/ f* t, v1 s$ @! X0 }嗯，非常感谢，我调节一下，试试