CIK细胞培养0、4、7、10、14天分别是什么样的？

momoenn

回复 ganggangtry100 的帖子/ X$ R1 M8 Q3 U8 [4 ?' T
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我们用的X-VIVO15  加的因子是IFN-r ，CD3和IL-2。加培养基是看细胞状态加。有没有可能是我们的因子效价不够呢

ganggangtry100

回复 momoenn 的帖子7 i6 Y9 ]0 K: ^4 C- L  d! U
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X-VIVO15  很好的培养基，你们CD3+细胞比较多，CD3抗体应该没有问题，看看IL-2和IFN-r在因子配置、保存上是否有失活（配置浓缩液-20度保存，平时工作液4度存放）可以尝试提高浓度或者三种因子一直添加，如果NKT还上不去，不要犹豫，换因子厂家吧~~~

momoenn

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& o9 s8 O+ F& c( V# h/ U1 c+ \回复 ganggangtry100 的帖子/ G: q, ?  O  H8 x3 e0 |

2 v) V/ I# y) I1 }$ uIL-2失活的可能性很小，IFN-r和你说的保存方法一样。IFN-r一直添加的话，不会对细胞造成杀伤吗？如果可以的话，能不能试下请教一下.先谢下了

地球外世界

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* O0 h3 r! Z$ A
. U1 A, y9 l$ @$ ^谢谢

地球外世界

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4 G3 |8 }6 P/ f2 O: C- Y. E' t非常感谢，培养阶段描述很详细，我再好好观察记录，观察是否与您的结果映照。

地球外世界

回复 zhengjianwei521 的帖子: F/ }/ f* v" v% f, g
) s- _2 U; g; K! T, U1 b
嗯，好的, E' o3 E* s$ Y" N; O7 A

地球外世界

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# w  e4 }6 i4 {* M" |6 o" N/ P  |* A4 X4 g4 b2 z
嗯，好的，现在用的是GT551培养基，用至少提前一天CD3和其他因子先包被培养瓶，再进行细胞培养，后期补加白细胞介素。这样培养，细胞增殖还是很慢，还在找原因。您觉得问题会出现在哪里呢？

ganggangtry100

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) H* {1 R3 M# M  CIK培养基中如果细胞生长慢，主要关注CD3和 IL-2的问题，他们两个是刺激细胞活化和和增殖作用，rIFN-γ等主要是增加细胞杀生活性的。, P9 a5 `$ I1 q9 J" n# I' @
   看看包被浓度和白细胞介素的量是否够或失活，如果足量，只要他们两个因子，用1640细胞都能很好的增殖。

ganggangtry100

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  CIK培养基中如果细胞生长慢，主要关注CD3和 IL-2的问题，他们两个是刺激细胞活化和和增殖作用，rIFN-γ等主要是增加细胞杀瘤活性的。7 z, H: d# c2 Q1 Y, I. t
   CIK本身也可以分泌rIFN-γ，个人认为不会对细胞造成不良影响。只是我的建议，各个实验室都有不同的培养方案，可以尝试一下。

地球外世界

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9 W$ X7 d  p2 c6 O+ C' n, c嗯，非常感谢，我调节一下，试试