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CIK细胞培养数量变化 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2015-10-12 10:48 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 fsj1987 于 2015-10-12 10:50 编辑 3 \0 h, C% `5 @; N2 z+ ^
2 Y  S. ?0 n* A8 M" l
我培养的CIK细胞第四十八小时数量为3*10的六次方,到七十二小时就成1*10的5次方了,是怎么回事啊?是我的细胞死了吗?这个正常吗?往后几天有没有可能数量上去啊?
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沙发
发表于 2015-10-12 14:18 |只看该作者
成球了....没吹散就计数了,所以数少+ N3 Z1 H+ l- g* ~4 x" l
或者是计数仪坏掉了、取样不匀什么的. f4 q+ C/ ?0 t1 y
话说3*10^6密度也太大了吧....
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藤椅
发表于 2015-10-13 12:18 |只看该作者
可能是取样不均,细胞死没死显微镜下观察一下,看看计数的时候有死细胞吗。再不然可能你的3×10^6的时候就计数不准了。4 [4 x7 U/ }2 C8 \: X' T
放在哪养的细胞啊。。。细胞密度都到3×10^6次方了没补液吗。。。
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板凳
发表于 2015-10-13 14:01 |只看该作者
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细胞计数是一方面,主要要看平铺在培养袋底下的细胞,细胞成团的话,你细胞计数起不了任何意义,所以先看细胞长势,再根据情况判断,要么你上图,我给你判断
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报纸
发表于 2015-10-14 11:28 |只看该作者
CIK细胞培养不要急于计数,前期应给予安静的生长环境,保证细胞能够尽快开始进入增殖阶段,如果研究需要进行计数,就需要先在镜下观察细胞的贴壁情况和聚团情况,需要充分的分散和悬浮才能保证取样有代表性,越数越少就是方法的问题了,差一天也不至于少那么多吧。
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地板
发表于 2015-10-14 11:29 |只看该作者
第一,刚分离的细胞,头几天有个自我选择和适应的时间;( h  z% E/ K- e% c& [" [# E& W
第二,如果是分离得到的细胞较多,可以多分一个75的培养瓶,以免因细胞多,为了争取营养而出现的自残;" Q6 [7 D* K& v
第三,七十二小时观察时,是否有细胞团出现,如果有,看量有多少,培养基是否有颜色变化,量少,可以添加自体血浆和白介素2* [5 \$ r$ u& d0 A; k+ i" M3 U
第四,第四天观察细胞团还是比较少的话,可以问问病人在采血之前是否用过什么抑制类的药物,如果有用过,那细胞的生长时间就是要长些
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发表于 2015-10-26 17:31 |只看该作者
48小时就到3*10E6了,这数量有些大呀,拿到14,15天不得长疯
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发表于 2015-10-27 08:59 |只看该作者
营养充足,方法正确的前提下,使用某些培养基培养是这样的,它会首先去除掉一些它认为的杂细胞,因为培养早期属于适应期,所以会出现细胞数降低的情况,得看看细胞活性如何,有没有下降,一般到第七天会进入快速增长期。
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