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楼主: 忘虚
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关于脐带贴壁的问题   [复制链接]

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发表于 2015-12-14 12:00 |只看该作者
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5 z  L# ?; t+ O4 B# z
4 S% k9 t8 X; @4 N- V8 J7 Y4 O我用的是无血清培养基,在20-25ml,我平时都加25ml
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发表于 2015-12-17 10:00 |只看该作者
组织块铺板后先在酒精灯周围晾晒5min,再加培养基恰好浸没润湿组织块,24h后补液至正常体积,这样做组织块贴附会牢固些,也比较容易爬出细胞
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发表于 2015-12-17 11:51 |只看该作者
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/ T4 O9 E$ ~3 S; v+ s" ^
$ K+ q. j) z/ d3 b. q( ~. V( }% a175组织块 建议20ml左右 加上组织块后总体积不要超过25 一般我都是总体积在22左右的  原代培养不要加培养基太多 只有组织块挨到瓶底 才有可能爬出细胞来
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发表于 2015-12-17 11:52 |只看该作者
回复 zengping120919 的帖子3 j& Z$ Q$ q) [5 B6 J9 N$ n

3 Q& c& \9 P1 _  ~8 {5 T间充质原代一般不会这么快出来的    有可能不是  
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发表于 2015-12-17 11:55 |只看该作者
种瓶后 就不要动了 中间过5-7天换下液  一般到两周左右肯定是会长出来的  尽量不要晃动瓶子
" f5 b9 m$ m( E/ F( A6 Q还有就是 个然感觉 组织块剪的不要太小 太小贴壁也不是很好 2 N; H. J, G6 x$ C! _
还有就是培养基加的也不要太多
( [$ A4 ~& s% u* u% L$ `* Z- {很容易的
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发表于 2015-12-21 16:19 |只看该作者
回复 woshibotao_01 的帖子
1 Z) W! X6 Y+ a
7 h! F4 i/ z2 [# M: W, s5 r谢谢,我采用半干贴  最近长得还可以   反复看了以前的  原因是脐带太差了    脐带一点都不白  很多都是黏糊糊的胶
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发表于 2015-12-23 11:38 |只看该作者
你说不好贴壁的话 刚开始贴壁的时候你的培养基加了多少毫升?4 Q' _2 g* F+ P0 m
我们一般是制备时先加5ml、次日补加5ml、第三日补加7或8ml,这样应该会比较容易贴住。
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发表于 2015-12-23 11:50 |只看该作者
回复 忘虚 的帖子8 G2 f. U8 Y) {! @; k- H7 D
# s5 O7 I  b  i2 B- b) r: p) Q
不客气。脐带存在的个体差异很大,也和采集时间的长短有关,当然是采集时间越短越好,个体差异就不用多说了,就跟人一样,有身体好的,有体格弱的,你懂。
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发表于 2015-12-30 13:08 |只看该作者
回复 蜗牛爱贝贝 的帖子& w8 z: `& S5 `* ~0 I  V

& c7 [  A& ?" x% _这是在脐带非常好的情况下,一般情况下要一周的,而且刚爬出来的细胞只有一点点,如果不仔细找的话,可能看不到
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发表于 2015-12-30 14:57 |只看该作者
回复 zengping120919 的帖子. L8 y% `  p* O2 o1 K& c  S

) J7 w+ n, |. S: t& E麻烦问一下,您四天长出细胞时,培养基的颜色有何变化?
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