关于脐带贴壁的问题

jenny114402

回复 正义的花生 的帖子/ _7 z5 r" Y6 `8 o* a' W7 ]! m
) l1 J# A) B1 }6 a$ r9 d
我用的是无血清培养基，在20-25ml，我平时都加25ml

zsykdx

组织块铺板后先在酒精灯周围晾晒5min，再加培养基恰好浸没润湿组织块，24h后补液至正常体积，这样做组织块贴附会牢固些，也比较容易爬出细胞

蜗牛爱贝贝

回复 正义的花生 的帖子* i: Y2 m: B/ |' e' I( L
! n8 k* A: L% x# j6 y5 O! ~
175组织块 建议20ml左右 加上组织块后总体积不要超过25 一般我都是总体积在22左右的  原代培养不要加培养基太多 只有组织块挨到瓶底 才有可能爬出细胞来

蜗牛爱贝贝

回复 zengping120919 的帖子8 a) N+ d( x* b7 c: x

4 r9 u6 s1 c6 A2 y5 s间充质原代一般不会这么快出来的    有可能不是  

蜗牛爱贝贝

种瓶后 就不要动了 中间过5-7天换下液  一般到两周左右肯定是会长出来的  尽量不要晃动瓶子 ( g6 z( s4 J; V. r- c, t. ^
还有就是 个然感觉 组织块剪的不要太小 太小贴壁也不是很好
. m' _" Y) o9 U# L还有就是培养基加的也不要太多, U$ Z& V0 v: U7 I+ ]5 P. @
很容易的

忘虚

回复 woshibotao_01 的帖子6 X7 N- O. W. i& B1 ?; T

; Z0 ]& j) Z4 ~谢谢，我采用半干贴  最近长得还可以   反复看了以前的  原因是脐带太差了    脐带一点都不白  很多都是黏糊糊的胶

游遍芳丛pine

你说不好贴壁的话 刚开始贴壁的时候你的培养基加了多少毫升？' N( U, \1 }% G! q
我们一般是制备时先加5ml、次日补加5ml、第三日补加7或8ml，这样应该会比较容易贴住。

woshibotao_01

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7 ~2 J& w: w$ r0 Q  o& y! {
9 k# e4 l0 C) ]" a8 y3 ~0 |* f不客气。脐带存在的个体差异很大，也和采集时间的长短有关，当然是采集时间越短越好，个体差异就不用多说了，就跟人一样，有身体好的，有体格弱的，你懂。

zengping120919

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& t' o0 i" G# L  i
% U3 W( w; Z" w  F0 q这是在脐带非常好的情况下，一般情况下要一周的，而且刚爬出来的细胞只有一点点，如果不仔细找的话，可能看不到

张杉杉

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5 u0 r$ U7 w" d! ?' |! K% D+ E; v% a( O
6 p, ]1 }9 b% v2 T& ]* Q: T麻烦问一下，您四天长出细胞时，培养基的颜色有何变化？