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楼主: 忘虚
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关于脐带贴壁的问题   [复制链接]

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发表于 2015-12-14 12:00 |只看该作者
回复 正义的花生 的帖子, Y) v9 y  R8 j; o

9 b3 Z" F; I& [# v2 u/ S$ y& Y1 o) X我用的是无血清培养基,在20-25ml,我平时都加25ml
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发表于 2015-12-17 10:00 |只看该作者
组织块铺板后先在酒精灯周围晾晒5min,再加培养基恰好浸没润湿组织块,24h后补液至正常体积,这样做组织块贴附会牢固些,也比较容易爬出细胞
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发表于 2015-12-17 11:51 |只看该作者
回复 正义的花生 的帖子
4 ^5 _1 c2 p, \5 O
/ v( u* n9 o' L  A175组织块 建议20ml左右 加上组织块后总体积不要超过25 一般我都是总体积在22左右的  原代培养不要加培养基太多 只有组织块挨到瓶底 才有可能爬出细胞来
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发表于 2015-12-17 11:52 |只看该作者
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回复 zengping120919 的帖子$ `: |6 u6 n  }* P  g

1 y' c' ?: b3 h5 C  b3 a5 u间充质原代一般不会这么快出来的    有可能不是  
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发表于 2015-12-17 11:55 |只看该作者
种瓶后 就不要动了 中间过5-7天换下液  一般到两周左右肯定是会长出来的  尽量不要晃动瓶子
0 N. c  u- Y  L8 O% e. r3 D- F还有就是 个然感觉 组织块剪的不要太小 太小贴壁也不是很好 ; H3 ~4 g+ j( W: [, s, r
还有就是培养基加的也不要太多
  a9 o( \, e9 p" z2 I很容易的
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发表于 2015-12-21 16:19 |只看该作者
回复 woshibotao_01 的帖子  G9 `7 d' w, m/ M

" i: j. W: x' R1 D) ]5 I( o: }谢谢,我采用半干贴  最近长得还可以   反复看了以前的  原因是脐带太差了    脐带一点都不白  很多都是黏糊糊的胶
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发表于 2015-12-23 11:38 |只看该作者
你说不好贴壁的话 刚开始贴壁的时候你的培养基加了多少毫升?6 D# k! {( R$ ]0 S& \
我们一般是制备时先加5ml、次日补加5ml、第三日补加7或8ml,这样应该会比较容易贴住。
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发表于 2015-12-23 11:50 |只看该作者
回复 忘虚 的帖子
9 }" `! `5 X4 I+ {* [$ m. h5 J% t+ R! i9 _. d# I
不客气。脐带存在的个体差异很大,也和采集时间的长短有关,当然是采集时间越短越好,个体差异就不用多说了,就跟人一样,有身体好的,有体格弱的,你懂。
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发表于 2015-12-30 13:08 |只看该作者
回复 蜗牛爱贝贝 的帖子
; y! @; t4 \0 _1 h3 ^" Z
: [8 v- o" q! Q/ r* ?这是在脐带非常好的情况下,一般情况下要一周的,而且刚爬出来的细胞只有一点点,如果不仔细找的话,可能看不到
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发表于 2015-12-30 14:57 |只看该作者
回复 zengping120919 的帖子
5 l" U/ M& \0 i6 T8 c! d3 {9 X0 ]& _+ T. `9 ~2 R1 {) i% F# ]
麻烦问一下,您四天长出细胞时,培养基的颜色有何变化?
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