悬浮细胞冻存！

倒腾细胞

请问各位前辈，如果悬浮细胞连同培养基一起冻进负八十，没有离心后弃上清加trizol 。 这细胞还能用吗！？

ltickp

细胞悬液完全冻起来也是需要一点时间的，细胞应该会有一个沉降的过程，底部细胞应该会偏多，不离心去上清应该还是有细胞的，虽然细胞破裂了，但底部应该残留有核酸

pauldong

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8 D2 q8 ~1 z( U" r* Q
7 x) Z1 S7 G! s/ c3 w0 X不好意思，刚理解有点失误，细胞你是连培养基一起完整冻存的，只是没有离心，所以解冻后死细胞还在，-80度保存提RNA应该没有问题的

pauldong

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# f0 ?5 f; i* U6 z  ~! K+ d
' ]* i- j* P/ _5 B, w: ~不知你说的细胞还能用是怎么用，如果说要想复苏后继续维持活性，估计比登天还难了，如果说提取细胞里的RNA或者检测某类蛋白到还有可能，只是没有离心就弃上清了，严重怀疑你冻存的液体里还有多少细胞，总之不清楚你为何这样操作，还是因为失误。

jenny114402

如果要细胞估计不行。要RNA的话应该能行的通吧，因为我看trizol说明书写着-80度可以放几个月呢，做个PCR试试吧

watchen198891

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1 h. o7 n/ N0 \' x& T
$ d. k+ {1 N% M: B) I你提取RNA是可以这样的，加入trizol后-80℃冻存后解冻继续按照步骤提取RNA就行了。

晗晗

估计用不了了，没加冻存液，然后还没离心就弃上清液，细胞也跟着一起跑啦

firstaider

回复 倒腾细胞 的帖子9 a+ w; t* T4 n/ Z4 }4 }1 j( J& j
2 z* E. }) z& p4 X; \; G8 p
trizol是用来裂解细胞的

genhaoxin

细胞在没有保护下冻存，会有冰晶形成，融化后，细胞可能裂解。提RNA，我们一般都用RNAsefree的耗材，估计你冻存细胞的容器也不是处理过的，也用过没处理的，也提出来过。你可以取少量标本小试一下，跑个胶看看结果，不行就放弃。祝你好运！

倒腾细胞

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/ Z8 S* c; H3 t( l/ j. x
, ^' C$ t4 w6 @# m8 q# P% \) ^我不要细胞  我要细胞的RNA  我现在拿出来融化后 离心去上清 再加trizol冻存  还行么？