悬浮细胞冻存！

倒腾细胞

请问各位前辈，如果悬浮细胞连同培养基一起冻进负八十，没有离心后弃上清加trizol 。 这细胞还能用吗！？

shellyanlanlan

没有冻存液？悬浮细胞不离心，弃了上清还有细胞么?trizol 我们分子生物实验室以前是用来提取DNA/RNA以及蛋白质的其含有苯酚、异硫氰酸胍等物质，能迅速破碎细胞！

lgfffancy

可以复苏起来看看，加15%FBS,看看细胞存活状态，你这种情况，这样试试，看是否能过来一部分~

xiaofuren

trizol是用来裂解细胞的呀，赶紧复苏看看吧，估计不行了

swtarron

没有加防冻液啊？估计细胞应该已经不行了

倒腾细胞

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) K$ q! k$ w, Y8 e/ ]; d/ ]% P  A- U- V! x+ w: b
我不要细胞  我要细胞的RNA  我现在拿出来融化后 离心去上清 再加trizol冻存  还行么？

genhaoxin

细胞在没有保护下冻存，会有冰晶形成，融化后，细胞可能裂解。提RNA，我们一般都用RNAsefree的耗材，估计你冻存细胞的容器也不是处理过的，也用过没处理的，也提出来过。你可以取少量标本小试一下，跑个胶看看结果，不行就放弃。祝你好运！

firstaider

回复 倒腾细胞 的帖子2 j8 R2 a" F) p. p0 C
/ a# @; @6 g9 x
trizol是用来裂解细胞的

晗晗

估计用不了了，没加冻存液，然后还没离心就弃上清液，细胞也跟着一起跑啦

watchen198891

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( B/ E& I$ F: {8 o6 ~
6 ^# O3 t3 l! P你提取RNA是可以这样的，加入trizol后-80℃冻存后解冻继续按照步骤提取RNA就行了。