询问大家关于细胞消化的问题 - 间充质干细胞专区干细胞之家



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小小龙001

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楼主

发表于 2015-12-12 10:36 |只看该作者 |正序浏览 |打印

最近有一次消化MSC，在消化过程中出现絮状物，而且经过吹打也无法吹散，想问一下大家是什么问题，用的0.125%的胰酶消化到2分多钟的时候出现的

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20楼

发表于 2015-12-25 10:16 |只看该作者

我觉得应该是细胞密度大了；然后，我消化一般是0.05%的胰酶37度培养箱两分钟，镜下观察细胞收缩变圆少部分飘起来就加培养液终止消化；额，我觉得，如果是传代的话，有絮状物最好过滤下

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游遍芳丛pine

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19楼

发表于 2015-12-23 11:40 |只看该作者

我也遇到过总结了下应该是：
1、细胞密度过大了；
2、该批细胞状态不佳。希望能有帮助

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zsykdx

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18楼

发表于 2015-12-17 09:54 |只看该作者

我是用0.25的胰蛋白酶消化，在显微镜下关注消化进度，大约有20%细胞漂了就吸弃胰蛋白酶，用完全培养基终止后吹洗细胞。

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lijie_suc

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17楼

发表于 2015-12-16 10:10 |只看该作者

如果之前一直这样，会不会是胰酶反复冻融效果降低，细胞密度太大，出现的细胞团块？

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lgfffancy

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16楼

发表于 2015-12-15 09:23 |只看该作者

我养过MSC，你这个现象很常见，出现絮状物那肯定是细胞长得过密了，你没有及时传代；第二你用的胰酶可以改用0.25%的，消化一分钟之后，拿出来拍拍flask，这样利于细胞生长，不至于消化过久影响干性；第三听你的描述应该有3分钟，3分钟确实有点久了，一定要用medium使劲吹打，吹成单细胞悬液；但是我不赞成什么胶原粘连的问题，因为你没有coating，明胶之类的物质。记住两点：消化时间以及生长密度。