询问大家关于细胞消化的问题

小小龙001

最近有一次消化MSC，在消化过程中出现絮状物， 而且经过吹打也无法吹散，想问一下大家是什么问题，用的0.125%的胰酶消化到2分多钟的时候出现的

2013sp

是不是你的细胞密度太大，已经分化了，形成了团块？MSC是比较容易被消化的，可以用0.25%的胰酶，放在37℃培养箱一分钟，然后拿出来在显微镜下观察。MSC很容易消化过，要注意观察。
2 Q. m9 E9 }# K/ v6 v

yeshch

有可能是消化过了，DNA等从细胞溢出导致粘连，此时越吹越粘，建议消化时间短一些看看

zxd962735279

楼上说i的有道理，还有一点就是细胞密度很大，细胞过后很容易聚团

小精卫

是不是没分离干净

angel-niu

1.请问楼主的胰酶含不含EDTA？如果胰酶含有EDTA，消化能力会很强，加上细胞密度过大，很可能会形成团块，里面还好含有一些细胞间胶原，所以很难吹打开。
/ g) m: n$ C. O. S/ u5 }5 e2.楼主多长时间换液，细胞状态如何？用PBS冲洗了没，在换液前？如果长时间不换液，会出现此种情况，细胞代谢物加上污染可能。

woshibotao_01

絮状物，很可能是你细胞长的太密了，脱落的死细胞，凝结成的，不容易吹散。

小小龙001

回复 2013sp 的帖子  z3 T5 {1 ?" ?: p' N) w

! S+ `% S1 R/ y' S, a4倍镜下看大概融合率在85左右，而且细胞形态挺正常的，是不是胰酶的问题？

小小龙001

回复 yeshch 的帖子/ Y$ F! N& D! _: S

4 O/ h) p7 Q/ L7 o9 `  ~之前就是这样消化的，一点问题没有，这是第一次出现这种情况

小小龙001

回复 zxd962735279 的帖子- ]; c! T: _2 @2 b: V' p

# G: p9 i* F( Z, N" N用的175的瓶子，种瓶密度大概在1×10的6次方左右