干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

 

 

搜索
中源协和

免疫细胞治疗专区

欢迎关注干细胞微信公众号

  
查看: 50915|回复: 14
go

自体血浆   [复制链接]

Rank: 1

积分
26 
威望
26  
包包
178  
楼主
发表于 2015-12-21 08:55 |只看该作者 |正序浏览 |打印
干细胞之家微信公众号
最近做了一次自体血浆的制备,可是发现放置2天后就出现了浑浊状态,而且之前是有灭活离心的,求大神
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 1 + 5 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 1  包包 + 5   查看全部评分

Rank: 4

积分
1006 
威望
1006  
包包
4400  

金话筒 优秀会员 帅哥研究员 美女研究员 小小研究员 博览群书 热心会员 积极份子

15楼
发表于 2016-1-6 17:30 |只看该作者
一看就是没有离心直接灭活后放置的,经过震荡导致纤维蛋白重新悬浮,所以看起来很浑浊,建议灭活后离心转移到新的离心管中,切记用封口膜封口,避免污染,然后4度存放,常温是不行的
8 X! y9 ~( q  F. W  b0 E; S
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 15 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 15   查看全部评分

Rank: 2

积分
218 
威望
218  
包包
990  

优秀会员

14楼
发表于 2016-1-5 16:58 |只看该作者
56℃灭活30min,高速离心收集上清,再过0.22um滤筛;此外如果放4℃保存的话,不宜放太久
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 3 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 3  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 2

积分
54 
威望
54  
包包
260  
13楼
发表于 2015-12-23 11:36 |只看该作者
如果没有污染,再次灭活就好了。避免加入培养基出现絮状或凝胶状。特别是营养比较丰富的培养基。如果你用的是takara的培养基白蛋白含量高,营养比较丰富。如果自体血浆灭活不充分偶尔会有这种现象出现,另外自体血浆没必要加太多1%左右就行,个人经验。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 3 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 3  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 2

积分
287 
威望
287  
包包
748  

优秀会员

12楼
发表于 2015-12-23 11:31 |只看该作者
可将加血浆的培养基放于37℃培养箱中培养几天看是否浑浊或异常;用之前可以将加血浆的培养基3000rpm再离一次心。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 3 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 3  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
325 
威望
325  
包包
1282  

优秀会员

11楼
发表于 2015-12-22 18:09 |只看该作者
先做个菌检看看,如果不是污染,可以用细胞筛过滤一下或者在高速离心取上清。其实浑浊的用于细胞培养也没有关系,回输用就要小心一点了
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 3 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 3  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 2

积分
116 
威望
116  
包包
519  
10楼
发表于 2015-12-21 16:09 |只看该作者
同感,在灭活离心后,要把干净的血浆转移到新的离心管中放于4℃保存,尽量不要放置太久,如果使用时有析出,则需重新离心后才能使用
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 3 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 3  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 2

积分
96 
威望
96  
包包
374  
9楼
发表于 2015-12-21 16:03 |只看该作者
蛋白质析出。4 q. @9 R" a- Y. i$ [
不宜放太久。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 1 + 5 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 1  包包 + 5   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
468 
威望
468  
包包
1873  

金话筒 优秀会员

8楼
发表于 2015-12-21 14:46 |只看该作者
本帖最后由 gondobar 于 2015-12-21 14:46 编辑
+ s* L4 t* _+ U% ]/ X/ ^7 N
/ @: I/ D& D2 b0 u( X56度灭活30min,2000~2500离心10min,去下层沉淀,上清4度保存。如有浑浊用时可以在离心,对细胞培养没有影响。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 15 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 15   查看全部评分

Rank: 1

积分
26 
威望
26  
包包
178  
7楼
发表于 2015-12-21 13:22 |只看该作者
回复 lgfffancy 的帖子
& _& _% |; ^6 M! z- j2 S$ M4 k0 P
那这样的血浆在后续细胞补液的时候添加需要重新离心处理吗?不离心有什么影响没呀?
‹ 上一主题|下一主题 ›
你需要登录后才可以回帖 登录 | 注册
验证问答 换一个

Archiver|干细胞之家 ( 吉ICP备2021004615号-3 )

GMT+8, 2026-11-1 02:50

Powered by Discuz! X1.5

© 2001-2010 Comsenz Inc.