脐带间充质干细胞分离 - 间充质干细胞专区干细胞之家



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jddakui

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楼主

发表于 2015-12-30 10:43 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

脐带间充质干细胞分离消化，华通胶用1型酶到底对细胞损伤有多大？2个小时消化剩余组织块不多，但是也没分离出多少细胞啊？求解

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沙发

发表于 2015-12-30 10:56 |只看该作者

组织量多少？胶原酶的浓度？消化之后你怎么处理的？

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jddakui

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藤椅

发表于 2015-12-30 10:59 |只看该作者

回复木头1102 的帖子( m/ Y7 A! E" P; O- j

5ml组织块 1mm 0,1%胶原酶1 消化后+20ml培养基100目过滤 1500 离心10min 5ml重悬没看见什么细胞啊* F' n: |4 q2 }( }: v% V
求指导谢谢& T6 K+ n- C& X/ C% L7 {. s: p

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木头1102

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板凳

发表于 2015-12-30 11:16 |只看该作者

回复 jddakui 的帖子
0 ` w L- q9 |: v: u
1500？是转速还是离心力？我消化后是10倍的PBS稀释，100目过滤，2500rpm（约800g）离心15min，PBS重悬，1500rpm离心5min，培养液重悬后接种。一般会有许多残渣悬浮在培养液里，但也可见细胞（发亮的圆点）。我觉得你可以先培养这看看，过五六天在观察下有没有细胞贴壁。