请教有关活细胞染色和分辨

baby00000003

请教各位老师，可有一种染色方法，可以让活细胞和死细胞之间产生明显的颜色差异么？（苔盼蓝不算）: H7 p2 G7 v! D2 R2 w

' I) h: G( u; M  Y& H$ s实验目的是“连续观察某一培养体系中细胞群体的生存状况”，6 U( K5 [* J6 N% E9 j
即是说，不是染一次就完事儿，而是随着染色（一次性染色或者将染料添加至培养基都可以），细胞的生存状态可以随时反复观察。
2 V' \/ B, t5 x2 i6 t所以trypan blue 或者PI annexin-FITC之类的一次性方法就行不通了/ P! y% n( Q1 R3 E2 t

( p/ P0 e8 r  H, d& u/ ~' O) A4 T比如，使用EGFP基因转染组成型表达，活细胞即表达EGFP，可见绿色（我还不清楚这种蛋白完全降解失色需要多久）
6 l* ?9 w5 C; p+ z0 `2 I' G6 w或者有某种可以指示线粒体活性的染料，只要细胞活着，线粒体就有荧光之类的- `* ~6 t7 }2 X2 j6 N; A

3 j) u. j3 k6 p% h2 h; \7 `  ~' i各位老师有做过类似实验的经验可以分享么？4 N6 p. v' _4 Q$ u; o
多谢啦！

ytumuyangren

我可以理解为你只观察细胞的状态么？那样你就可以用慢病毒包装GFP基因即可，转染至需要观察的细胞，荧光显微镜下就可以观察了，只要细胞活着GFP就会一直表达。

baby00000003

回复 ytumuyangren 的帖子9 H- ?1 f2 s" ]6 z% V3 h. T7 K
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那个办法麻烦呢～又浪费钱～( D2 J6 \! n2 x% ~( o; c; C
我的理想是能在培养基里加某个试剂或者预处理下细胞，简单又便宜的
* }; x& p! a" v2 ]0 K* D6 _6 n' P只要它活着，就能一直发出可观察的信号，荧光、特殊颜色神马的～

ytumuyangren

回复 baby00000003 的帖子: y# ?/ y  r/ a* K1 |0 m4 W
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这个好像不好办到，目前了解没看到有这样的对细胞无毒无害还能发出信号的试剂。