胰酶消化问题

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胰酶消化时间过长，对以后细胞培养有什么影响？细胞会死么

yooung

胰酶分解细胞表面膜蛋白，消化时间过长，估计严重点会消死细胞，也可能导致以后细胞培养时细胞贴壁不紧。

baby00000003

试试看trypLE吧，据说是细胞在那里面泡上个半天都不会死

1195963542

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) m2 ^  B+ z$ i7 Y" a  k- ~. v! A: w2 m* l: @& x# e9 N$ L1 B! W' K3 u
终止原理是什么呢？      可以直接用培养基终止消化？

baby00000003

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) E& E4 _; _# M4 ?/ ~5 ?* \& n% |- a* D$ O0 n7 k& M
无需终止，离心洗干净就ok了.....

1195963542

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: `* r/ k0 ?4 P4 s! g9 V- W& P2 B+ @
哦  亲  你们用过么  听着这么好呢 呵呵

baby00000003

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( B( Q$ S8 @; B- A; F2 h
% F0 V; {5 y' L0 c* [: M+ w一直在用呀，不过没有故意的把细胞泡那么久过

1195963542

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3 P3 H* H# p8 U1 T1 K/ M1 e5 I; C
! `$ ^" c9 Y% z& D! K* _你们培养的是什么间充质干细胞呢，浓度是0.125%的么    时间控制在多长时间呢

tingting2113

回复 1195963542 的帖子9 Z8 O, w0 N: g) p& i

0 L$ C+ {& N1 Y& S' y影响细胞活性和贴壁状态，严重的情况细胞会死亡的。我们消化都是需要终止的，直接用培养基终止消化进程。

小猪32

回复 1195963542 的帖子- u- r; x; U$ m# u

1 h% k; K1 c: |& I胰酶消化时间过长会影响细胞贴壁，所以建议消化前将胰酶复温，加入胰酶后，镜检，若细胞皱缩，细胞间出现间隙，即可轻拍培养瓶，细胞会成流沙状滑落，加入完培，吹打即可