求脐带血CIK细胞培养答疑

只因偶然

本人近期培养的脐带血cik细胞出现了一点问题，在第8天之前，脐血cik细胞长速还可以，细胞密度有3左右，细胞形态正常，可是第8天转培养袋之后，cik细胞就不怎么长了，密度渐渐降低，在1.0左右，而且细胞还抱团或者成絮状。无菌检测，内毒素支原体检测都无异常。培养箱co2浓度 、温度、培养基、细胞袋批号都没变。求大神帮找原因。

1233hyp

请问第八天以前，培养的容器体积是多少？会不会密度太大，抑制生长了？可以参考一下：http://www.stemcell8.cn/thread-69130-13-1.html

why77yhw

是否进行过细胞活率检测？根据你描述的现象判断，活率应该较低。不知道你用的什么培养基，该培养基能否承受细胞密度在3左右呢？！密度过高，营养会不足！还有，是否排除是真菌污染？无菌检测的方法是否足够灵敏，菌量低的情况下也有可能检测不出来。

老姜

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* B, E: J% U8 b/ A1 U5 }! u# h6 J! O) C
据经验：首先，细胞培养袋的质量很重要
; u; M' B7 E" `5 h) |              其次，刚一转袋后添液量要少，使细胞处在相对高的浓度下，并且，每天要轻轻摇动培养袋，使聚团的细胞分散。- f* N- G" R2 m6 R+ U( ]
        一般情况下，细胞在培养袋中扩增的不如培养瓶中快，因此，每天的“关照”更为重要

fjq729587158

可能是密度问题，密度保持在1×10E6个/mL

momoenn

细胞抱团，有絮状，这样的情况下你计数是不准确的。你可以再观察两天，看看情况会不会改善。从培养瓶到培养袋，因为环境的改变、细胞浓度的改变，细胞会有一个适应期。

只因偶然

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0 `7 N5 s- _' K  d! N5 m
以前细胞密度也差不多 转袋后培养速度都正常

只因偶然

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" p2 S' H! V, w% }- u! @/ y+ p- E5 ?& M0 [9 J
细菌真菌支原体抗酸染色革兰氏染色都没问题，以前也是这密度，培养都正常，就这段时间后期就慢了

只因偶然

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- U& n* e; ^7 y8 h5 y  k+ S& H
每天上班都会轻晃拍散

只因偶然

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+ p& K2 R* }1 U以前密度也差不多都没问题，就近期转袋后变慢