关于CIK培养过程中产生的絮状物，求高手指点

seergene

最近有一例血脂特别高的患者，血液分离后，血浆里的脂肪特别多，即使灭活离心后仍是如下图。培养时用了T551培养基，加入了人血白蛋白。前2天都正常，第3天传入175培养瓶后开始出现絮状物，细胞都聚集到一起。此絮状物不是正常CIK增殖过程中产生的细胞团，无法吹散。细胞生长状态受到严重影响，增殖速度变慢。哪位高手遇到过类似现象，跪求解决办法，最好可以让细胞恢复到正常状态，谢谢！！！
) R2 d3 \5 K6 H) `' W2 T0 }0 S: j3 G

994545

最近用了国产的培养基，细胞后期果断出现了絮状的细胞团，  其他条件都一样。

fenlichong

你直接将灭活后的血浆加入所用的培养基中，放入培养箱中培养1-3天，看是否同样会出现絮状物，如果会就是血浆的问题，如果不会，就再找原因。

lyj-0017

回复 seergene 的帖子5 P  `9 Y! ^: l' S& v. V0 w/ s

2 |6 @5 _" n* W, }你这个絮状物就是死细胞黏连正常细胞的结果，吸出来废弃掉吧，基本与患者的细胞质量有关系，也与你的操作手法有一定关系，前几天不要乱动细胞。

mengnancy

细胞本身质量问题，增殖能力差，细胞死亡，蛋白、DNA等释放，具有粘性，细胞培养3-7天都会出现这样的情况。建议发现后立即将死亡细胞团过滤掉，提高细胞培养密度，观察是否能正常增殖。

seergene

回复 biluolinyu 的帖子
; d% C0 V' _  m0 h
$ P3 E6 J& ]3 W0 [9 v' ?+ t肝素钠

seergene

回复 biluolinyu 的帖子
1 }, v; I! z% v) v( t) g: b" j  H' g6 O8 v% r" G
自体血浆始终没加，加了点白蛋白，也不多。应该不是死细胞导致的，絮状的东西是第3天才出现的。

seergene

回复 cloudycity 的帖子
$ s" o% T6 X# a9 \' [8 Q7 y6 B1 m7 L0 J, t- K  `
谢谢了，今天会处理一下试试，有消息会随时更新的。

biluolinyu

另外楼主的抗凝剂是什么，枸橼酸钠还是肝素

biluolinyu

首先要确保同一批次的培养瓶没有问题，有些时候实验中用到的耗材有些问题会导致细胞出现上述情况, r4 |- |$ r! @5 x
其次楼主不要再添加血浆了，可能是由于血浆内的油脂过高导致的，如果必须要添加血浆可以尝试-20保存后4度融化，然后在离心取上清+ Y; ]- F. {: Y5 |: g1 k( f, @
这种情况的絮状物应该不是粒细胞死后释放出的遗传物质造成的，如果是其他细胞死后造成的絮状物，会比这个长，基本在第二天就会出现
/ N0 J% ~/ `5 R, H4 a如果楼主5天之后仍然觉得培养效果不好，或者是血浆处理后仍然无法继续使用，可以将培养基更换为x-vivo