关于CIK培养过程中产生的絮状物，求高手指点

seergene

最近有一例血脂特别高的患者，血液分离后，血浆里的脂肪特别多，即使灭活离心后仍是如下图。培养时用了T551培养基，加入了人血白蛋白。前2天都正常，第3天传入175培养瓶后开始出现絮状物，细胞都聚集到一起。此絮状物不是正常CIK增殖过程中产生的细胞团，无法吹散。细胞生长状态受到严重影响，增殖速度变慢。哪位高手遇到过类似现象，跪求解决办法，最好可以让细胞恢复到正常状态，谢谢！！！# F+ a8 |* I' A2 d9 i7 ~6 X8 L

seergene

最近一直在观察，最近2天絮状物增多，但是单个的细胞很少。

小沙弥敲木鱼

养养看吧，血浆油脂太高，建议不要加了。絮状物是细胞么？

细胞海洋

请教CIK培养过程中出现的絮状物问题！！！* L: i7 X8 T2 [5 U8 m
http://www.stemcell8.cn/thread-69130-1-1.html6 n8 t+ j4 J. v8 @

seergene

回复 小沙弥敲木鱼 的帖子$ M7 Q! d% I! n0 K
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是细胞，形态上看起来有点像CIK，但不确定。

cloudycity

1.不是CIK是死细胞团····会粘住正常细胞，越养越惨····很难再长了···用100微米的滤网过滤，然后再把体系降下，培养密度提高来试试···
2 n% M: ^: }8 i/ R6 f0 M2. 吸白膜层的时候尽量只吸那一层，其他的都不要了。: t$ Y7 ~- k& f/ i, x5 _3 q
3.我觉得是其他的一些免疫细胞（巨噬、单核、粒细胞）死掉后会放出的蛋白网···（猜测···）

biluolinyu

首先要确保同一批次的培养瓶没有问题，有些时候实验中用到的耗材有些问题会导致细胞出现上述情况: \$ b0 b: X- o# Z9 @3 p! X
其次楼主不要再添加血浆了，可能是由于血浆内的油脂过高导致的，如果必须要添加血浆可以尝试-20保存后4度融化，然后在离心取上清
- ~# a) l5 a; r- P7 b这种情况的絮状物应该不是粒细胞死后释放出的遗传物质造成的，如果是其他细胞死后造成的絮状物，会比这个长，基本在第二天就会出现
. \% x% g% _0 m) H9 H7 u如果楼主5天之后仍然觉得培养效果不好，或者是血浆处理后仍然无法继续使用，可以将培养基更换为x-vivo

biluolinyu

另外楼主的抗凝剂是什么，枸橼酸钠还是肝素

seergene

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谢谢了，今天会处理一下试试，有消息会随时更新的。

seergene

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自体血浆始终没加，加了点白蛋白，也不多。应该不是死细胞导致的，絮状的东西是第3天才出现的。