外周血细胞分离效果不好

小沙弥敲木鱼

外周血放置在四度冰箱4小时左右采取分离细胞，步骤都按正常的走，可是分离的白膜层和上清液分解线不清晰，没有之前的立即做的效果好，碰到这种情况怎么处理？？？？谢谢

juzideds

在加ficoll前混匀一下，试试

cloudycity

1.把血液样本和Ficoll都静置到常温再用
4 e+ y8 d- c5 I! W2.用新的Ficoll
2 R2 ^; Q1 ?, x- F. u4 D7 I' m- O6 K0 S

baby00000003

把buffy coat和上层清液都抽出来，混PBS，混匀了离心

biluolinyu

如果采血后到实验室可以分离这一个时间段不是很长，建议不要存放在4°，直接放于室温，这种情况下分离效果会好一些。另外就像楼上说的那样，确保血液和ficoll复温后在使用，或者ficoll直接37预热

zhengjianwei521

放在4度的时间有点久了，最好立即处理，三四个小时不用放冰箱，拿出来最好到常温在做！

拉二胡的拉尔夫

1.血液保存的时候最好有摇床。! @8 Y' }) G7 e( P
2.将血液放置常温在操作，不要加热哦。
1 D) m* t0 r8 ~3 _) B* ^3.加大生理盐水的稀释倍数。
& J* ^. ^& H6 ?9 p! X) d* V4.挽救措施，将红细胞上面的细胞都收集起来，加生理盐水或PBS混匀，然后加ficoll重新分离。
' T' m* r. E, L2 W0 \希望能帮到你

心蕾

1、血液样本和Ficoll都恢复到常温；1 g6 X" E% Z9 e+ o
2、Ficoll缓慢加，尤其是刚开始是一定要慢；+ Q8 W. ?: j2 o) o8 v9 A) m' h
3、离心机的离心力要合适。

吕小松

不要放在4度保藏，ficoll要平衡到室温，离心机参数要适合，我觉得主要问题还是血放在了冰箱了

why77yhw

回复 拉二胡的拉尔夫 的帖子( I# D7 _9 Z1 t9 }6 E% ^

6 i8 Q, c9 M; [! d! a如您第4条所说，这种情况您实际操作过吗？效果好吗？是否需要再吸点红细胞层靠上层的一点点细胞，考虑到可能会有部分白膜未分离出来，求指点~谢谢