［求助］这份PBMC怎么回事儿？

nailute1985

事情是这样的，我用同一份脐带血提的PBMC，分成两组，第一组加的是可溶性的OKT3，第二组是包倍的OKT3。但是发现在我把第一组PBMC加到瓶子里面之后，过了仅10几分钟，就有很多细胞贴壁死亡了。虽然我们原来做的PBMC有一部分肯定是也会贴壁，但是都是正常的单核细胞贴壁，折光度很好的。这次这个都是黑色的死细胞，而且死亡事件太快了！如果是细胞问题的话，另一份加到包倍后的瓶子里的细胞就没事儿。求解……
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上图是第一组
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这是第二组
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lgfffancy

污染，很严重的污染

baby00000003

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- q( J* \. T) _5 h& Z这是如何看出来的呢？

张月儿

那应该就是可溶性的OKT3的问题了吧。污染也不会那么快出现死亡吧，应该不是污染的问题。

veda327

这样我想起了一份洁净车间培训资料里面的一个细菌2小时可以变成281兆个细菌的表述
# V1 W" W9 Y1 f, B, b. S
$ i& ?/ z$ P8 i) y4 O' K5 I我觉得应该是含有可溶性OKT3的培养体系的问题，里面含有强致死的毒性成分、溶液的pH不对，或者溶液的渗透势不对等！

veda327

黑色的是细胞碎片、或者是培养体系里面某种成分的结晶

momoenn

你这两个图片是怎么来的啊？你说的死细胞黑色是染色了吗？看不懂你现在细胞第几天了？没有看到实物，单看单个细胞形态和聚团情况，如果这是第2-3天的镜下直接观察的图像，好像第一个状态要好一些

hello_yun雨

试剂不会是过期的吧。

nailute1985

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% f1 ]- q9 t0 B+ n& B/ l( X9 {这两个都是D0天的，没染色，那些黑色的就是死细胞。

nailute1985

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试剂肯定不会过期的，都是4度保存的，刚分装好的。