脐带组织块培养法，原代传代i后第三天的细胞

罗裙漫紫蝶香

脐带组织块培养法，原代传代i后第三天的细胞，传代方法是，用移液枪吸走组织块，PBS清洗2边，酶消化，可是第二天细胞大部分都死了，只有很少部分贴壁，且已经铺展开来，分不清是不是间充质干细胞了，下图是继续培养至第三天的细胞0 {7 P3 y5 q- s9 o' P. v! L% {% y
[attachimg]77839[/attachimg]

yingfeixiang

怎么这个样子呢？你是不是胰酶消化时间太长了细胞死掉了，长的不好接种密度也有要求的，太少不行，你按多少接的

罗裙漫紫蝶香

回复 yingfeixiang 的帖子/ ^4 F# ~, |9 Y# \* M2 V! B
% y' X9 U- I: V; k/ J
我没有计数，有4-5个集落种到6cm的皿中，显微镜下看密度也不稀

田甜

亲，这是你上个帖子中原代细胞传下来的不？在你之前的那个帖子里，我建议你传代后换培养基：按你的图片，你的脐带间充质干细胞已经开始衰老了，传代时不换培养基的话，会继续衰老下去，就像你现在这个帖子发出的图片一样。
9 a: _  \% v* X4 t; F$ |下次你再做原代的时候，注意血清换好一点的，一般还能养到P5/P6代，形 态不错，血清不好的话，影响很大的，没有选到合适的血清，就挑选一款合适的无血清培养基或是间充质专用培养基，国产的也行的。: Z" c% j( G! C, I5 b
合适的生长时间：原代生长时间11-15天，传代后3-4天能汇合至90%以上。

罗裙漫紫蝶香

回复 田甜 的帖子
1 ?' B0 ^  L) _9 \  c3 x. m2 r! w
7 p, Z9 s' `$ `" F( J% Y亲，眼力真好，是上次那个帖子里的，我用的培养基是间充质干细胞的培养基，而且之前用来养过多种间充质干细胞，效果都好的，而且我要无血清培养，所以就没换，现在就养不起来了

yingfeixiang

回复 罗裙漫紫蝶香 的帖子; Q- M' X8 g) ~& M
* n5 T; f: R/ ?# W; _9 U# K: L
这个的按密度接种，你不计数不太好。个别可能因为个体差异导致长的不好，其它都应该长的很好

晗晗

亲,这细胞都衰老死啦,建议还是别要拉,扔啦把

罗裙漫紫蝶香

回复 晗晗 的帖子4 e) c3 J8 z8 i6 \2 o* A
& u- K8 ^$ f& o1 l
今天第四天，已经长满了，我传代了又

罗裙漫紫蝶香

回复 田甜 的帖子
* f; L% o5 v3 P2 ?# J" R$ o8 Y/ C( Y2 X( Z; m
这是P2代的，感觉比之前的状态好啊; p& K5 h+ T9 }2 ], n+ I* U3 ^% S

pcljsw2008

第一张图老化感觉严重，第二张又好点，第三，四张基本正常，可能是密度有点低，胰酶浓度有点高