原代细胞污染

tlms1991

最近取脐带，组织块法培养脐带间充质干细胞，顺带取脐静脉内皮细胞，离心后接种细胞就看到有细菌在活跃，觉得可能是天热所以容易滋生细菌，该怎样减少污染呢？急急急！

ltickp

脐带消毒时间适当长点，分离器械和安全柜要无菌，注意无菌操作

tlms1991

谢谢大家，最近一直没来看帖子。前段时间，虽然有污染，但是传代下去的内皮细胞生长还是不错的，也看不到会动的黑点。有时候我怀疑，细胞是可以和少量细菌共存的。

Natalie

你先检测一下组织保护液是不是污染了，其次加点庆大或者肝素，注意无菌操作

月_幻影

组织块法培养的话，在分离华通氏胶前先用加了双抗的PBS反复清洗至没有血污，然后要保证整个操作过程的无菌、器械的灭菌是否彻底等。。。

随时准备下线

脐带保存液是不是污染了？这么短时间就可以看到细菌，除了这个问题，只能是你处理样本时间放置太久了，同时留取样本可能也有一定问题。

晗晗

用PBS洗洗,然后加双抗试试

zhouweixing000

初步判断这种污染储存脐带的溶液或者容器有问题，先去自检一下，如果都没问题可能就是取脐带的过程有问题，双抗和肝素钠是需要加一点的，你的这种情况我不认为是耗材或者是你操作过程有问题

2357710447

回复 chenguangyu 的帖子, r9 x2 j( K/ p' X( ?. u

* y) R' n. p5 Q, l+ o/ z抗生素的量一定要控制好    对细胞的生长有抑制作用    而且时间太长的话  细胞的形态很差   流失很难检过     

chenguangyu

首相自检一下各种试剂和耗材，安全柜培养箱是否是无菌的，在保证标本无菌和无菌操作合格的情况下，一般很难被污染。加点双抗可以预防一下，但不能依赖加双抗来避免污染。