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[请教] 转一个抗体的问题:晒到好的IgG型抗体很难 [复制链接]

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楼主
发表于 2009-5-15 21:18 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印
我从事单抗工作已有3年了,成功过不少单抗,以前都是重组蛋白做的,很容易
9 L: \$ ^, e+ ?- _% r7 J现在我们改成了多肽结合载体免疫,免疫剂量每针在20-80ug之间$ h) W9 t' U8 t1 s' z" C
加强针都是减半的,为了加快进度 选择4针后做融合,第一针和第二针间隔3周,
- J; k8 r+ ]* G- d( ]( k加强针间隔2周,第三针后测血,elisaOD值还可以有1.0以上 血稀释5次方级,
$ T0 o" ]& l; R  m+ J0 s! k融合5板,后期克隆每孔大概有3-5个小克隆,5 o7 N3 _+ ?5 Q8 y: ~& R
用了反筛选发筛选克隆,免疫bsa的用ova检测,羊血清封闭,后期做wb也出了好的条带,但发现里面好多IgM型,而且和一些无关的孔都有交叉,做了37度2天的稳定试验 发现很多IgM都还比较稳定,能晒到好的IgG型抗体很难,请问问题到底出到哪了?
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