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我从事单抗工作已有3年了,成功过不少单抗,以前都是重组蛋白做的,很容易
0 S) l' c2 e: ]现在我们改成了多肽结合载体免疫,免疫剂量每针在20-80ug之间
+ N( L! ?/ [$ m& J3 }- W+ Q加强针都是减半的,为了加快进度 选择4针后做融合,第一针和第二针间隔3周,; n+ ?' Y) @$ D9 _$ X. u5 B- P
加强针间隔2周,第三针后测血,elisaOD值还可以有1.0以上 血稀释5次方级,
" S* L8 }" N6 o- G融合5板,后期克隆每孔大概有3-5个小克隆,
q+ A8 V# ~# Q, s用了反筛选发筛选克隆,免疫bsa的用ova检测,羊血清封闭,后期做wb也出了好的条带,但发现里面好多IgM型,而且和一些无关的孔都有交叉,做了37度2天的稳定试验 发现很多IgM都还比较稳定,能晒到好的IgG型抗体很难,请问问题到底出到哪了? |
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