细胞治疗的T细胞，NK细胞大家分离人外周血PBMC后怎么诱导扩增培养的？

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初次涉入细胞培养这一块，对于免疫细胞如何特异扩增单独培养一直都不是很懂，是PBMC先分离出来一直培养，达到一定数量后进行分选，检测，还是先将PBMC分离成不同类群的细胞，然后针对性地进行各类细胞的特殊培养？依据是什么？培养要求条件具体是？求大神指教。

niliu730323143

回复 大少爷 的帖子' X, W/ e7 ]/ d; \  ?

: q1 N* w* o; Q1 I有没有文献可以推荐？

wozuixie

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kaiyou

抗体包被诱导激活扩增

niliu730323143

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% X) N1 C& B( }, M) Y这是贴壁的吗？

LVXUEYAN1101

做科研的话可以分离出PBMC之后进行分选然后再陪养，但是分选造价会比较高；要想成本低点，那就分离出PBMC之后进行诱导培养

伊诺强

分离出PBMC后，根据需要直接特异性诱导培养

海螺天空

刺激因子一般是先包板，真正开始扩增是在四天之后了

niliu730323143

你们的PBMC是怎么培养的？

生物太次郎87

抽取80ml左右外周血，通过ficoll密度离心，分离出PBMC再接种，接种时用T75培养瓶（瓶底包埋CD16），用前用生理盐水清洗3次（注射器吸取打到底面对着那个面，防止把包被的CD16冲掉），接种总体积设为V，加入诱导分化因子（10%）、自体血浆（5%）、淋巴细胞无血清培养基（85%）。培养72h后全量换液，换液培养基还是淋巴细胞无血清培养基，之后每隔2-3d换液一次，添加5%的增殖因子，后续培养。