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[讨论] 细胞冻存密度   [复制链接]

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楼主
发表于 2016-11-18 16:58 |只看该作者 |正序浏览 |打印
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用含10%的DMSO冷冻保护剂冻存细胞,总体积1ml,最佳的细胞冻存密度是多少?如果细胞多或者少了,对细胞会有影响吗?我们从0.5-6*10^6都冻过,解冻后,细胞生长良好,没有很明显的差别。
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15楼
发表于 2017-4-5 09:54 |只看该作者
请教一下,你说的细胞生长良好,没有很明显的差别,是怎么得出的结论呢,有没有做过数据统计,有没有做验证试验,有没有一定的代表性?
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14楼
发表于 2017-4-2 21:47 |只看该作者
不同细胞类型的细胞冻存密度需要验证。5-10*106个都得验证,培养后看细胞扩增数量和目的细胞的指标等。取最合适的就行。再说了,现在的冻存液和冻存曲线都有差异,合适自己的就行。
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13楼
发表于 2017-3-3 12:43 |只看该作者
1.不同的细胞类型冻存时的细胞密度不太一样,可以是0.5百万---10 百万不等。
. O# n$ `$ U$ C- {& g) x2.冻存的体积可以是1ml---1.5ml之间。体积过大的话会增加污染的几率。1 m* t! M  k9 _# n6 F) r  {7 Q
3.细胞冻存时DMSO的最终浓度是10%左右。常用8%---10%。9 x7 y8 j0 `  @- h
4.特殊类型的细胞(比如干细胞,原代细胞等)在冻存时需要的细胞密度稍微大一些。
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12楼
发表于 2017-3-1 11:56 |只看该作者
细胞类型不同,冻存密度不同;另外也要考虑计数结果准不准的问题

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11楼
发表于 2017-3-1 11:55 |只看该作者
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10楼
发表于 2017-2-23 15:03 |只看该作者
我们的成纤维细胞是2*10^6
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9楼
发表于 2016-12-24 08:17 |只看该作者
这主要看个人经验,我们一般细胞铺满80-90%进行冻存,根据不同细胞要求进行传代,如1:3或者1:5传代。
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8楼
发表于 2016-12-23 21:24 |只看该作者
冻存密度在5*10^6个/ml~1*10^7个/ml,根据细胞大小而定,密度不要太高了,否则起不到保护作用,复苏的活率会降低,再就是冻存液也很关键。
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7楼
发表于 2016-11-22 15:31 |只看该作者
这个要分是什么细胞。鉴于你目前的密度应该是常见的间充质或者免疫细胞。所以你可以试一下1到1.5 *10的7次方应该没问题。
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