关于SD大鼠BMSCs，原代培养就发生了老化现象的原因？

苏木素黎

关于SD大鼠BMSCs，原代培养就发生了老化现象，可能是哪些原因导致的呢？# L  l' }+ L+ W- i% e
大家培养该细胞传代时所用的胰酶浓度是多少？0.25%的浓度是不是对细胞伤害有点大？
2 l4 R5 d3 O0 L  ^; \我是菜鸟一枚，恳请大家帮忙解答，谢谢！

fm001982

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新手的话胰酶建议用0.125%的，边消化边观察，传代一般2到3分钟就可以了。
2 q+ e- S& d/ E4 K( a0.25%的浓度可以用，但时间要把握好，传代一般1分钟就消化得差不多了。
! {) g( n6 c& p- ?还要注意你的培养基，如果是买的话，注意酸碱度是否适宜，自己配的话注意渗透压。
0 v6 s; a/ u2 k9 @另外，接种的浓度也有一定影响。

sports123

这个浓度可以的，注意的是不要消化时间太长。

苏木素黎

回复 sports123 的帖子3 g3 ^2 \4 o3 k8 K3 ^
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3分钟可以吗？

苏木素黎

回复 fm001982 的帖子" e1 ?5 O- M8 T" x! K
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谢谢，很有帮助

sports123

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3分钟时间有点长，一分种左右即可，具体情况视细胞密度而定。

honey棉花

这个浓度可以，胰酶使用前需要预热至37℃，消化前需要用DPBS洗一遍细胞去除血清等，这样消化的时候只要30秒-60秒就差不多了，一定要主要观察，消化过了损伤细胞，细胞也容易出现老化现象

苏木素黎

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% D  z7 k& @( b2 d" \& ]9 w: g好的，谢谢，原代培养时细胞中含有许多杂细胞，如果消化一分钟，其中大部分好像都是杂细胞？

hyyh03271016

这个浓度的话，消化时间1-2min就可以了

晗晗

这个浓度可以，但是不要消化的时间长了，消化太长时间细胞会有破损，或者可以浓度小一点，消化时间长一点