关于SD大鼠BMSCs，原代培养就发生了老化现象的原因？

苏木素黎

关于SD大鼠BMSCs，原代培养就发生了老化现象，可能是哪些原因导致的呢？5 r, G0 q) D$ u/ k- F
大家培养该细胞传代时所用的胰酶浓度是多少？0.25%的浓度是不是对细胞伤害有点大？
9 Y3 o( h7 a6 o& Z* N5 G$ v' P# x# g我是菜鸟一枚，恳请大家帮忙解答，谢谢！

fm001982

2 Y1 }, C& B! \, K

2 N# L- R& K$ A/ i- c新手的话胰酶建议用0.125%的，边消化边观察，传代一般2到3分钟就可以了。6 |; ?8 c; H2 I; d
0.25%的浓度可以用，但时间要把握好，传代一般1分钟就消化得差不多了。
$ B3 D- d+ y! @; Z: I1 l还要注意你的培养基，如果是买的话，注意酸碱度是否适宜，自己配的话注意渗透压。0 O  \4 s. c& I( g+ f8 {' o+ _! y5 ^
另外，接种的浓度也有一定影响。

sports123

这个浓度可以的，注意的是不要消化时间太长。

苏木素黎

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  i/ n( b+ e7 |) v# `! C, x3分钟可以吗？

苏木素黎

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6 J+ d( q3 \) ^) I& e& ^
% Y1 N/ J3 `6 N. `: Y谢谢，很有帮助

sports123

回复 苏木素黎 的帖子) ?; S8 J. e# s5 {1 r# p: z

0 I" ?1 K3 Y3 M3 r: t5 I+ W3分钟时间有点长，一分种左右即可，具体情况视细胞密度而定。

honey棉花

这个浓度可以，胰酶使用前需要预热至37℃，消化前需要用DPBS洗一遍细胞去除血清等，这样消化的时候只要30秒-60秒就差不多了，一定要主要观察，消化过了损伤细胞，细胞也容易出现老化现象

苏木素黎

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! s, s: p$ H8 M. c) ?. _5 {% p% ?- \/ D+ W0 k; _/ F1 B* ~; [9 K/ `
好的，谢谢，原代培养时细胞中含有许多杂细胞，如果消化一分钟，其中大部分好像都是杂细胞？

hyyh03271016

这个浓度的话，消化时间1-2min就可以了

晗晗

这个浓度可以，但是不要消化的时间长了，消化太长时间细胞会有破损，或者可以浓度小一点，消化时间长一点