关于T细胞培养扩增

nailute1985

最近培养外周血分离的PBMC扩增T细胞的时候，一开始t细胞生长状态很好，形态也是活化的形态，抱团也比较多。我们就是OKT3刺激之后常规添加IL2，大概48h补加一次，维持密度1*10^6/ml，但是发现细胞总是在D8天左右的时候从活化状态回到那种球状的静息状态，进而开始有细胞凋亡发生，增殖明显受到抑制，撑不过D10左右，细胞就会挂。我感觉应该不是个体差异问题，但是经过lentivirus感染后的T细胞，培养条件不变，生长状态却出奇的好。请问大家有没有遇到T细胞D8天左右凋亡的情况出现？如何解决？谢谢

nailute1985

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nailute1985

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fftian3912

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大侠，能给个QQ联系方式吗？请教您T细胞培养的问题！谢谢！！！

niliu730323143

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3 Z! ?3 c5 u. g4 P$ vCD3和CD28

nailute1985

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我们是临床实验，不可能加PHA的

nailute1985

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OKT3是一个抗体，可以跟TCR-CD3抗原复合物结合，激活T细胞信号通路，只有激活T细胞的信号通路，T细胞表面才会上调IL-2受体，才能跟IL2结合，活化JAK／STAT信号通路，细胞才能增殖。

niliu730323143

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一般来说，应该用PHA和IL-2来培养的，或者CD3/CD8加IL-2养的，反正我现在已经一头雾水了。

niliu730323143

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一般来说，应该用PHA和IL-2来培养的，或者CD3/CD8加IL-2养的，反正我现在已经一头雾水了。

niliu730323143

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4 \6 |( D" x6 m' G# f, y/ L- oOKT3刺激有什么作用？