关于T细胞培养扩增

nailute1985

最近培养外周血分离的PBMC扩增T细胞的时候，一开始t细胞生长状态很好，形态也是活化的形态，抱团也比较多。我们就是OKT3刺激之后常规添加IL2，大概48h补加一次，维持密度1*10^6/ml，但是发现细胞总是在D8天左右的时候从活化状态回到那种球状的静息状态，进而开始有细胞凋亡发生，增殖明显受到抑制，撑不过D10左右，细胞就会挂。我感觉应该不是个体差异问题，但是经过lentivirus感染后的T细胞，培养条件不变，生长状态却出奇的好。请问大家有没有遇到T细胞D8天左右凋亡的情况出现？如何解决？谢谢

nailute1985

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9 c& R% w, S+ W) J' L( z! p& M) ~- r) k8 H0 i- `
我用的x vivo 15加了HSA

nailute1985

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6 j" ^# p" W9 S  u
扩增倍数有多少？我初期还是可以的就是D8左右细胞形态就变回球形了，增殖也慢。你们是在孔板养还是flask？

nailute1985

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3 Y" b) }9 o; K6 F: i8 cOKT3是一个抗体，可以跟TCR-CD3抗原复合物结合，激活T细胞信号通路，只有激活T细胞的信号通路，T细胞表面才会上调IL-2受体，才能跟IL2结合，活化JAK／STAT信号通路，细胞才能增殖。

nailute1985

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9 b3 q. Q! C) z0 M" k6 j/ ?, Q
0 W: v$ w$ a0 o我们是临床实验，不可能加PHA的

nailute1985

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nailute1985

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