我的MSC怎么了？求大神指点！

Leo_yihan

全骨髓贴壁法分离的小鼠BMSC，分离24h后换液，培养基是DMEM/F12+10%FBS+双抗。这是第四天的细胞，长成这个鬼样子。。。! k5 F9 z' r- j- F, W! v8 `% M
各位大神我分到的是MSC吗？如果是的话形态为什么不是长梭形的，而且有很多细胞呈扁平不规则形状。细胞内含物很多，可能是哪里出了问题？
5 ~' j) v* V- j2 e! j另外我实验室的显微镜拍照软件有点问题，无论是像素还是颜色都有些诡异，辣眼睛，请见谅。。

chenguangyu

支原体污染？

zhu1019

我们做的其他来源的原代MSC形态是会这样的，往后传几带形态就会变长梭形了。另外感觉背景很脏，不排除支原体污染的可能，如果细胞生长很慢的话，建议可以做个支原体检测。

baby00000003

这个形态挺正常的，要有耐心给它时间，融合率上去了，就能看出旋涡状了' t& z* ?2 N$ r
P0的可以考虑多加点血清，再加点EGF==之类的各种GF可能会长得更好一点

Leo_yihan

回复 baby00000003 的帖子: C# ~% S9 q- z5 ^
; l1 }4 _# Z5 y! V! c: _/ Q/ b9 u( x5 F
之前分离过一次，细胞长得很慢，形态一直都是这个样子，到P3代就老化了，基本不长，会是支原体污染吗

cyl黄金杖

我们做的其他来源的原代MSC形态是会这样的，往后传几带形态就会变长梭形了。另外感觉背景很脏，不排除支原体污染的可能，如果细胞生长很慢的话，建议可以做个支原体检测。首先确认是不是冻存问题。

baby00000003

回复 Leo_yihan 的帖子! |3 c; q9 }" b6 p9 h

$ p7 Z/ M1 |3 n7 G这我可不好断言，实在怀疑就检测一次呗～
5 z" q; K, X* r. Z7 C+ y. O如果是我，先换血清做个平行对照看看

Diane0321

培养基不用加bFGF吗？我们的MSC培养都会添加bFGF的

Leo_yihan

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1 V& p- `" r/ P6 o) B0 I6 [/ T: k$ V' ~
看好多人都说不用加就可以养的很好，但是接下来我打算要加些了，不知道细胞长得会不会好点

121qwq

没什么，杂细胞多了点而已