求助！为何我的BMSC用αMEM养不好？

whyme705

养原代BMSC一开始用的是αMEM培养基，试了很多次，每次都养不过P1，老化得很严重。一开始怀疑是消化过度或接种密度的问题，但后来换了**的培养基之后，用的同样的操作方法步骤，养出来的细胞可以传好几代还能保持很好的形态。但受限于课题需要，估计之后是用不了**的培养基了。想请教下大家，这是什么原因啊？我是不是该加点生长因子，bFGF？# D# R& u/ V2 B1 e8 z( f% j: F

$ Y! `/ o9 w1 y: l2 `8 J上两张图；图一是αMEM养的P1老化的养子
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图二是**培养基养的P2
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柠檬冰

我们实验室用过DMEM高糖，DMEM低糖，和F12培养基，貌似都还可以。。。不过最近梅雨季节，细胞快死完了。。。

whyme705

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加了细胞因子吗？用的是啥血清？ 这个。。为何会和梅雨季节有关。。？

孤独山石

F12培养基+10%FBS不加因子。不过我想知道和梅雨季节有什么关系，培养箱的温度湿度二氧化碳浓度都是恒定的。

wzs1985

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个人认为，培养基都不是关键，关键的是你的血清。你得好好留意下血清是不是正品还是水货。国内血清市场太混乱了。

zhouyonhzhan

用的什么血清？1 @% k7 _" x4 _5 p: u' y

五口二木

我也有体会，在梅雨季节取原代不容易成功，虽说原代是在恒温培养箱里培养的，但它们与季节之间好像有一些相关性，原因不明。

whyme705

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GIBCO，胎牛血清，南美的

whyme705

whyme705 发表于 2017-3-12 18:25 , d3 C4 t# `% V4 c4 l5 ~
养原代BMSC一开始用的是αMEM培养基，试了很多次，每次都养不过P1，老化得很严重。一开始怀疑是消化过度或接 ...

8 g- b: y8 x8 Y% H/ B/ E/ |9 n后续：6 X& p3 t) @  l" N$ N- S5 T
后来往αMEM中加了10ng/ml的bFGF之后，细胞可以维持很好的形态了。有时间再上图。

shangshiwang

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请问用的哪家公司的bFGF？