求助！为何我的BMSC用αMEM养不好？

whyme705

养原代BMSC一开始用的是αMEM培养基，试了很多次，每次都养不过P1，老化得很严重。一开始怀疑是消化过度或接种密度的问题，但后来换了**的培养基之后，用的同样的操作方法步骤，养出来的细胞可以传好几代还能保持很好的形态。但受限于课题需要，估计之后是用不了**的培养基了。想请教下大家，这是什么原因啊？我是不是该加点生长因子，bFGF？, [/ |5 a, q* }1 Z; `% m

7 O- d; W8 a9 ~$ S* t* {上两张图；图一是αMEM养的P1老化的养子; W+ E" h  y+ D0 q
# }2 M' l/ t9 Z. O3 l4 u

2 F% c1 J. T+ _图二是**培养基养的P23 W2 C! h+ g4 h

柠檬冰

我们实验室用过DMEM高糖，DMEM低糖，和F12培养基，貌似都还可以。。。不过最近梅雨季节，细胞快死完了。。。

whyme705

回复 柠檬冰 的帖子
( y# {0 V3 W1 {/ f, l8 I5 P# M# p" l2 U* ~9 w+ p" ^* _4 s
加了细胞因子吗？用的是啥血清？ 这个。。为何会和梅雨季节有关。。？

孤独山石

F12培养基+10%FBS不加因子。不过我想知道和梅雨季节有什么关系，培养箱的温度湿度二氧化碳浓度都是恒定的。

wzs1985

回复 whyme705 的帖子6 R& L- \# w3 T) Q+ U+ q

* i. s. l& y9 t; l. `+ }9 {个人认为，培养基都不是关键，关键的是你的血清。你得好好留意下血清是不是正品还是水货。国内血清市场太混乱了。

zhouyonhzhan

用的什么血清？& I3 ?- X( e7 @; C: r. S5 _

五口二木

我也有体会，在梅雨季节取原代不容易成功，虽说原代是在恒温培养箱里培养的，但它们与季节之间好像有一些相关性，原因不明。

whyme705

回复 zhouyonhzhan 的帖子* m5 ~- J( r: i1 q, `
* J6 B1 V5 W( M$ b0 M& K$ u/ x
GIBCO，胎牛血清，南美的

whyme705

whyme705 发表于 2017-3-12 18:25
  y/ v5 L0 O# J& b5 A$ [% R养原代BMSC一开始用的是αMEM培养基，试了很多次，每次都养不过P1，老化得很严重。一开始怀疑是消化过度或接 ...

+ `( t: Z( G  Z) C5 m( ]/ Y
后续：# n9 M4 I3 I4 a) m/ |
后来往αMEM中加了10ng/ml的bFGF之后，细胞可以维持很好的形态了。有时间再上图。

shangshiwang

回复 whyme705 的帖子7 Z4 h4 X5 l/ s6 @

2 T4 M2 i; [" S+ R请问用的哪家公司的bFGF？