免疫细胞分离的几种方法

shy-shen

表面标记分子法0 ?4 e, E" d8 C4 j, ~8 F
E-花环沉降法
0 X+ ?+ M1 |7 q0 q7 g人类T细胞表面有SRBC受体绵羊红细胞受体，能够与多个SRBC结合，形状如花环；* F. s- [/ y; u. m- ?' ~4 }
亲和淘洗法+ s( g$ Y1 ]& z* m" e
特异性单克隆抗体包被在聚苯乙烯培养皿/板表面，吸附具有相应表面分子的目标细胞，如抗Ig抗体吸附B细胞、抗CD3抗体吸附成熟T细胞，这些都属于正选分离
7 J) X/ T8 N# k' y细胞毒法0 Y0 h4 X6 }3 w$ D% Y
补体介导的特异性细胞毒分离法，在抗体的作用下裂解能与抗体结合的细胞，从而分离出不能与此抗体结合的细胞群，属于负选方法
- r- B" q9 Z. k+ f4 {荧光激活细胞分离法) u1 ]! x# f6 V
最有效法，目标细胞经荧光素标记单抗结合后，在激发光照射下会产生荧光，由FASC分选功能分选出来
1 B. }6 f* H$ F, F" S/ L9 [1 V免疫磁珠分离法
* d: [1 N/ }8 g, Z) I$ ~+ z在磁珠表面包被特异型抗体，与目标细胞表面的抗原结合而与特定细胞粘附，再用磁珠分离
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对低渗的敏感性4 _3 w$ @4 G, ?( w* o) a
红细胞对低渗的敏感性要高于白细胞，例如红细胞裂解液7 |9 D; |4 x2 q. @, j' q
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相对密度差异
" a' c" H& A# _2 @2 T" G1 K$ o聚蔗糖-泛影葡胺密度梯度离心法即FICOLL
+ N( g8 P( N1 b3 _; e/ w5 i: T红细胞和粒细胞相对密度大于ficoll，沉底；血浆密度最低位于最顶端；分层液位于中间，PBMC位于血浆和分层液的白膜层处4 `3 C# ^: y" J1 n3 Z
PERCOLL密度梯度离心法
$ r( ^" U1 s0 V! |$ j% [- t最上层是死细胞残片和血小板，然后是单核细胞层，然后是淋巴细胞层，最后是粒细胞和红细胞) p; b! Z0 n$ O  F
+ z1 x5 Z0 r9 P1 O; ?, ~# \
黏附和吞噬能力
' h1 |4 ]8 o2 w单核和巨噬细胞具有较强的粘附能力，加入细微的羟基铁颗粒或乳胶颗粒，待单核和巨噬细胞充分吞噬后，用密度梯度离心或者磁场吸附去除，利用尼龙毛柱分离B细胞。: a6 e8 S  X. t5 d7 A
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特异性促生长因子
& Z) C9 P0 d, x" p1 F; e利用不同种类的免疫细胞需要的生长因子不同进行促进生长