免疫细胞分离的几种方法

shy-shen

表面标记分子法
7 O% u7 e1 `* u5 {3 r+ S+ t0 EE-花环沉降法/ D6 Y- E) ~  c
人类T细胞表面有SRBC受体绵羊红细胞受体，能够与多个SRBC结合，形状如花环；
" m% k' D1 i, O; h/ \3 C: W, ]: r亲和淘洗法
9 J! B- Z* L: L/ |* C0 G) R, E$ Q特异性单克隆抗体包被在聚苯乙烯培养皿/板表面，吸附具有相应表面分子的目标细胞，如抗Ig抗体吸附B细胞、抗CD3抗体吸附成熟T细胞，这些都属于正选分离, Q: _& }0 `/ \' j& P$ f5 E
细胞毒法
: [* U* r0 i7 B; P' K. i补体介导的特异性细胞毒分离法，在抗体的作用下裂解能与抗体结合的细胞，从而分离出不能与此抗体结合的细胞群，属于负选方法
# ^$ j1 u7 V( g" X2 E! H0 F: j荧光激活细胞分离法
0 I6 e1 c- q6 [# b& I最有效法，目标细胞经荧光素标记单抗结合后，在激发光照射下会产生荧光，由FASC分选功能分选出来$ {! ], s2 n  {. t/ ^) r# b9 M+ p
免疫磁珠分离法$ v% s# }9 D  O; e# P; e9 R
在磁珠表面包被特异型抗体，与目标细胞表面的抗原结合而与特定细胞粘附，再用磁珠分离0 _/ b( x# n2 ?5 A1 K

4 l4 T# n( X6 e6 h对低渗的敏感性
: j) o! k3 b7 s红细胞对低渗的敏感性要高于白细胞，例如红细胞裂解液1 P' r# s9 v) }! `5 R* ~. X& s

$ d5 |! A/ G0 U相对密度差异
3 ]& R7 g. g9 ?9 L聚蔗糖-泛影葡胺密度梯度离心法即FICOLL
4 X9 R' H% F$ i" E2 c' E1 P红细胞和粒细胞相对密度大于ficoll，沉底；血浆密度最低位于最顶端；分层液位于中间，PBMC位于血浆和分层液的白膜层处
# _- P1 K) T- {! ?6 w6 u( gPERCOLL密度梯度离心法
; h0 R/ K- v  s4 h9 U最上层是死细胞残片和血小板，然后是单核细胞层，然后是淋巴细胞层，最后是粒细胞和红细胞8 P5 i; T' L. g& N1 C6 h
* G% f6 {2 b- q5 ?5 K: a' f
黏附和吞噬能力
/ s) }8 |" ]' g0 @: d单核和巨噬细胞具有较强的粘附能力，加入细微的羟基铁颗粒或乳胶颗粒，待单核和巨噬细胞充分吞噬后，用密度梯度离心或者磁场吸附去除，利用尼龙毛柱分离B细胞。
! f# |( \6 X) D. ?9 R7 O2 r7 U: }. u6 ~7 N& o9 o$ G6 h4 G
特异性促生长因子6 w2 V- q% v! j
利用不同种类的免疫细胞需要的生长因子不同进行促进生长