von kossa染色具体方法

lhpce

我想知道von kossa染色具体方法，有谁能告诉我。

mamiya

不知您要得是不是矿化结节的Von kossa‘s染色呢？
+ K/ h! u# [2 q; }: c" Y! H: j
Von Kossa’s矿化结节染色法 原理是将矿化基质中的磷酸盐(钙)、碳酸盐(钙)转变为磷酸银、碳酸银，然后用日光、紫外线或强还原剂使其还原为黑色的金属银。本试验染色过程中未作细胞衬染。$ c7 ^: P+ ]5 e" V7 D$ ^, v
1.固定后的细胞爬片用0.01mol/L PBS(pH7.4)洗涤2遍；% h  W3 _' b( h) N2 f3 I
2.浸入5%硝酸银水溶液中10min，日光或紫外光曝晒10 min，蒸馏水洗涤；
' y" O: o4 w1 c' d3 j: z1 B3.浸入5%次亚硫酸钠溶液中，蒸馏水洗；  L; A9 q& l" i
4.1%中性红衬染1 min，水洗，晾干，酒精系列脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。

tonyyang

vonkossa stain.pdf (13.05 KB)

2009-7-13 14:57 上传

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tonyyang

1. Sections to water. 切片脱蜡至水  
8 P- z5 l4 m* I+ H" \0 h7 K7 C2. Place sections in 1% silver nitrate solution under ultra- violet light for 45 minutes. 9 {! q5 [8 g. i" s0 g8 z; u
置于1％硝酸银溶液在紫外光下45分钟
/ L1 z1 ^. n" j2 l0 ^3. Wash in distilled water. 蒸馏水漂洗
: l& y; d( ~; g% ^4. Treat with 3% sodium thiosulphate for 5 minutes. 3％硫代硫酸钠处理5分钟
3 q' I) X# E3 K9 M) \5. Wash in water. 用水漂洗- Q( Z( T+ h; R) k) ^% \9 C( j
6. Counterstain with van Gieson for 5 minutes. Van Gieson复染5分钟
, [1 T8 Q* Y7 ~4 j5 \7. Wash in alcohol. 乙醇漂洗
2 |1 ^+ N  p$ e8 C8. Clear . Mount sections in DPX 透明封片

tonyyang

VON KOSSA
* A/ g# {2 S# {+ s1. Sections to water.
; q8 O: m; W2 j' t2. Place sections in 1% silver nitrate solution under ultra- violet light for 45 minutes.. ~/ E: _, u. w9 M
3. Wash in distilled water.' q) k/ y3 f$ w* y) ^
4. Treat with 3% sodium thiosulphate for 5 minutes.
! d1 c& R5 Y1 f- C! J9 I& A+ c5. Wash in water.
8 k3 Q' D/ X3 D* }  Z2 k6. Counterstain with van Gieson for 5 minutes.5 E! O. k' U: F+ j8 R/ E
7. Wash in alcohol.  g. s' }7 G! b8 [
8. Clear . Mount sections in DPX
$ R4 a' k2 u5 T  e( \9 w
2 ^' v4 ^2 m8 ]& r/ q# v0 n--------------------------------------------------------------------------------% [' H2 q' \0 c( o7 ^
RESULTS
/ m9 e5 F3 k8 W- [Mineralised bone black Osteoid red
; `& o1 n0 O/ L" o5 o( \" m! f# d$ D" s& ~
--------------------------------------------------------------------------------
9 O. l: I+ G9 C9 o  R% o6 HSOLUTIONS
9 q  |2 e, S, m0 T% YVAN GIESON --1% acid fuchsin 7.5 mls+ I8 _8 O$ \) L( }
--Saturated picric acid 92.5 mls
. B( a( w9 [. N9 V* B1 @--Distilled water 100 mls

xxkldf

知道了

雪岩

谢谢，不用甲醇在-20度固定吗？

雪岩

回复 4# tonyyang 9 |5 g6 F/ k, @6 E9 \* Z
  J2 J, P' M5 C4 N! P1 L
  P( a8 O  a5 a% f6 [( l  v' o6 I
    谢谢你，不用甲醇在-20度固定吗

missyoudad

THANK U

wndx2012

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