von kossa染色具体方法

lhpce

我想知道von kossa染色具体方法，有谁能告诉我。

mamiya

不知您要得是不是矿化结节的Von kossa‘s染色呢？
- S  q4 o7 A; b$ z) x  i
. z: G1 @5 o0 \, i) X8 _/ aVon Kossa’s矿化结节染色法 原理是将矿化基质中的磷酸盐(钙)、碳酸盐(钙)转变为磷酸银、碳酸银，然后用日光、紫外线或强还原剂使其还原为黑色的金属银。本试验染色过程中未作细胞衬染。. R5 x3 f  A7 H: V
1.固定后的细胞爬片用0.01mol/L PBS(pH7.4)洗涤2遍；/ P/ B8 L( L- n+ J
2.浸入5%硝酸银水溶液中10min，日光或紫外光曝晒10 min，蒸馏水洗涤；, Y" N0 l/ v& j
3.浸入5%次亚硫酸钠溶液中，蒸馏水洗；
) Y& O" h  W9 o/ F" m4.1%中性红衬染1 min，水洗，晾干，酒精系列脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。

tonyyang

vonkossa stain.pdf (13.05 KB)

2009-7-13 14:57 上传

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tonyyang

1. Sections to water. 切片脱蜡至水  
) q" }1 S+ v9 o9 V2. Place sections in 1% silver nitrate solution under ultra- violet light for 45 minutes. 4 w- A. @" m& ]5 x: |) e
置于1％硝酸银溶液在紫外光下45分钟
9 {7 h$ ]+ \3 |% K3 T3. Wash in distilled water. 蒸馏水漂洗
* ^) o4 P9 j5 S; O+ i, t! C$ t4 ?4. Treat with 3% sodium thiosulphate for 5 minutes. 3％硫代硫酸钠处理5分钟+ e5 x3 G& j; j7 K
5. Wash in water. 用水漂洗% o1 {5 T8 J8 @- H
6. Counterstain with van Gieson for 5 minutes. Van Gieson复染5分钟
. S% m) `8 {) _( ?: F+ i0 E7. Wash in alcohol. 乙醇漂洗; C2 l& Z- }& H+ e; z, w& T, O
8. Clear . Mount sections in DPX 透明封片

tonyyang

VON KOSSA $ r/ U( W" x5 T
1. Sections to water.; M7 y0 p! s. s
2. Place sections in 1% silver nitrate solution under ultra- violet light for 45 minutes.# X6 ~; D% [0 q9 ?& J
3. Wash in distilled water.
* Z1 l& z9 t5 e6 J, `8 \% ?* o) k4. Treat with 3% sodium thiosulphate for 5 minutes.4 s. z1 }; z) M3 {% K/ I& {- z5 y
5. Wash in water.( J0 k& J; m4 u) }, w, F. \! w
6. Counterstain with van Gieson for 5 minutes.2 ?: x8 s8 v* Q  B/ X
7. Wash in alcohol., o/ S, \/ K- F) `
8. Clear . Mount sections in DPX
' U! s+ w4 b: q3 N9 n2 z/ y1 ^/ J# c; M: T# C, l! p, q$ U
--------------------------------------------------------------------------------
5 j+ }7 D& Y7 o8 qRESULTS
  o# N# Y5 V4 g) S- ]Mineralised bone black Osteoid red# w4 ^6 M- `% f1 [

- c; N3 u2 b1 f* ^1 i) C--------------------------------------------------------------------------------
) H8 ^# i/ O/ H$ l% x3 @; n( S/ M0 MSOLUTIONS6 a/ }; G# [& ~; c& _, _, i
VAN GIESON --1% acid fuchsin 7.5 mls6 N. m- F) c& w" e4 m5 j$ w; z5 h9 M
--Saturated picric acid 92.5 mls2 F9 G/ y' w: L+ H! \
--Distilled water 100 mls

xxkldf

知道了

雪岩

谢谢，不用甲醇在-20度固定吗？

雪岩

回复 4# tonyyang 3 o+ v; Q* V4 D" M8 D- y
4 G1 @- g1 M' c5 w
6 [6 a/ f0 y0 H, q
    谢谢你，不用甲醇在-20度固定吗

missyoudad

THANK U

wndx2012

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