间充质干细胞诱导成软骨用番红O染色的图拍片

honey棉花

用gibco的诱导分化培养基诱导间充质干细胞分化成软骨细胞，诱导21天后，用番红O染色，所有的细胞都染成鲜红色。说明书上推荐使用番红O染色检测，但是番红O可以染色所有的细胞核，又可以用于鉴定软骨细胞，请问其原理是什么？
! P: G4 k( u* }3 X5 g5 |0 n. U图中所染色的红色细胞核能说明成骨诱导成软骨细胞吗？

honey棉花

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honey棉花

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baby00000003

成软骨不是要用U底96孔板离心成致密的小细胞球再诱导么？
3 ^6 f! @$ l2 N/ y" U5 O9 I# \7 x而且印象里是要用toluidin blue染色.....

luoziwei

这张照片说明不了什么的。首先，软骨诱导实验不是要球状培养吗？其次，即便你是平板培养诱导，拍照的相差显微镜也不对，要看清细胞才能说明问题。而且，能不能说明是软骨细胞的key marker 是Collagen II，safarin O只是胞外基质染料，一般的成纤维细胞的胞外基质都能吸附一点染料，所以说明不了问题。希望对你有用

niliu730323143

能否告知下hMSC细胞分选流程？

小飞雪2300

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4 |1 L2 H4 M3 v1 d6 U- Y! D# B# L* h8 ~! E2 h0 A/ T
能有相关的知识分享吗？谢谢！

luoziwei

回复 小飞雪2300 的帖子* v3 i6 N8 j% I; x

  p! K) `* c/ J. d8 `! Y本文上半部分说到MSC体外诱导软骨分化的protocol$ ]$ y' j- |2 }% q  Q0 ~! C) l& Z

honey棉花

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做了平面培养和微团培养，但是为图案培养细胞密度大很容易造成细胞脱离培养板的情况，诱导第4天微团就脱离了，根本检测不到* d6 z8 B3 H% L7 [: U5 ]! {# M
番红O燃料是说明书推荐使用的，做空白对照液发现了所有细胞都能染色

luoziwei

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" D" L# r% r% y; T9 p) u3 L* @. Q7 F6 k
细胞团找不到就有可能在换培养液被冲掉了。番红O染色不能作为MSC软骨分化的key marker，关键还是collagen II。成纤维细胞的胞外基质也能吸附番红O染料