请问实验室用于做细胞爬片的盖玻片如何进行消毒处理？

lizhen

我的实验是培养骨髓基质干细胞（MSC),传代第三代在6孔培养板培养，我想请问一下 做细胞爬片的盖玻片如何消毒处理，每个孔可以放几块，我想节省试剂和培养基，谢谢

zhaoyan1983

是不是能直接看细胞板的就不用做爬片？我们实验室里好像没有人做爬片啊！做爬片和不做爬片效果有多大差别？
+ f: m. p4 t7 Y9 J+ k; O

arwen

忘了说了，如果把细胞直接种在细胞板上，细胞就不会死，可见那是玻片的问题，不知大家用的是什么样的玻片？我们这边的共聚焦显微镜只能看玻片，不能看细胞板，非做爬片不可

arwen

我们的是泡碱，泡酸，双蒸水浸泡过夜，灭菌，烘干，然后用多聚赖氨酸包被两个小时，PBS洗三遍，但细胞还总是死（种未分化细胞的时候还好，但如果种细胞后进行诱导，细胞就大量死亡），不知是怎么回事，求助……

HMC

我们是直接取盖玻片用无水乙醇清洗，然后用PBS洗涤3次，不用过火，直接就铺在孔板里面，接种细胞之前可以用0.1%的明胶处理下。

idealgas

我们是直接取盖玻片用无水乙醇清洗，然后再过火，直接就铺在孔板里面，接种细胞之前可以用0.1%的明胶处理下。

idealgas

我们是直接取盖玻片用无水乙醇清洗，然后再过火，直接就铺在孔板里面，接种细胞之前可以用0.1%的明胶处理下。

luoziwei

我都是75%酒精浸泡保存，使用的时候拿出来放在PBS浸泡照紫外过夜，然后多聚赖氨酸处理，风干后加PBS洗，然后置于孔内用培养基润洗一遍，最后吸出培养液种细胞

conggu

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2 l" b% n4 R/ ?: w6 k  C1 D我一般是把拨片跑在无水乙醇中，使用前用酒精灯灼烧，然后放入六孔板中。。。一定要用无水乙醇，用镊子夹，这样才不会有水印。

王乾

把爬片小心放入板空里面，用PBS洗个几遍，再照一到两个小时紫外就可以，当然有人推荐先用PBS洗，在高温灭菌，我的经验是再怎么洗一凉干总会有水渍，其次照一下紫外就可以达到灭菌的目的，我从来都没污染过。照完紫外，加上明胶或者多聚赖氨酸室温一到两小时，吸掉，PBS洗几遍，然后就可以传细胞了，由于是做细胞亚定位，所以细胞尽量传稀点，这样就可以保证一个视野下尽量有较少的不理想的细胞干扰，一般情况下24孔板的一个孔我铺3万左右的Hela细胞，效果很不错。