请问实验室用于做细胞爬片的盖玻片如何进行消毒处理？

lizhen

我的实验是培养骨髓基质干细胞（MSC),传代第三代在6孔培养板培养，我想请问一下 做细胞爬片的盖玻片如何消毒处理，每个孔可以放几块，我想节省试剂和培养基，谢谢

smlyk

1、取干净的盖玻片若干，用洗衣粉轻轻擦洗（注意轻柔，不要留下明显痕迹，方便以后观察细胞）
6 x& q% j  D6 W2、5％的稀盐酸泡过夜！! o1 |3 C' ~+ U/ k/ \. z  u& I% M
3、取出盖玻片后，烘干后，泡酸，过夜！4 ^; _" `! A+ [" ^- V
4、用自来水反复冲洗！
/ K: T) o, v$ U& k3 s$ b5、（我个人认为这一步很重要）将玻片放在水中；先准备一干净饭盒，往里面铺几层纱布；用镊子轻轻将玻片夹至纱布上，每块玻片之间不接触。若干片后再铺纱布，接着再放玻片！
; g  E  V! _- [. {+ r% o5 z6、高温高压消毒！2 P4 Y" y; a* B
以上是细胞爬片之前玻片的处理，爬片之前用0.1％明胶涂玻片，干后在铺板效果也很好！
8 D) u6 x% u( V+ h一点建议！

wojoo

我的经验是; j0 {9 g6 `+ `( \; n$ f
1、取干净的盖玻片若干，用洗衣粉轻轻擦洗（注意轻柔，不要留下明显痕迹，方便以后观察细胞）
1 G3 u6 K0 |9 j3 [( S8 B2、硫酸重铬酸钾过夜$ W5 W. r3 }' `! c# p' E, _
3、取出盖玻片后，用自来水反复冲洗30分钟。
8 C4 z& u" V- M; {% Y4、用双蒸水漂洗10分钟。
0 F; a4 @4 a5 z8 {& O5、取出后直接放入100%酒精中（如果没有也可以置入95％的酒精中）过夜后，用镊子夹取出，自然晾干即可用。也可以置于酒精中长期保存，用时取出。; X" _0 M6 X" d+ S3 \1 V% y
本人认为骨髓基质干细胞贴壁能力较强，可以不用明胶包被；由于酒精有消毒作用可以不用高压或者高温。

sailboat

一般可用酒精泡，之后紫外灯照射
7 W7 Z% T1 j9 a! }, M2 @: C但是还会有水印，这个问题不好解决3 ^2 W# K% R/ S- h* }
若是六孔板，每空可放5～6个爬片

王乾

把爬片小心放入板空里面，用PBS洗个几遍，再照一到两个小时紫外就可以，当然有人推荐先用PBS洗，在高温灭菌，我的经验是再怎么洗一凉干总会有水渍，其次照一下紫外就可以达到灭菌的目的，我从来都没污染过。照完紫外，加上明胶或者多聚赖氨酸室温一到两小时，吸掉，PBS洗几遍，然后就可以传细胞了，由于是做细胞亚定位，所以细胞尽量传稀点，这样就可以保证一个视野下尽量有较少的不理想的细胞干扰，一般情况下24孔板的一个孔我铺3万左右的Hela细胞，效果很不错。

conggu

8 ]( v, p$ T) b, q% D7 q1 ]
% e, t1 ]8 C, d+ ?% h
我一般是把拨片跑在无水乙醇中，使用前用酒精灯灼烧，然后放入六孔板中。。。一定要用无水乙醇，用镊子夹，这样才不会有水印。

luoziwei

我都是75%酒精浸泡保存，使用的时候拿出来放在PBS浸泡照紫外过夜，然后多聚赖氨酸处理，风干后加PBS洗，然后置于孔内用培养基润洗一遍，最后吸出培养液种细胞

idealgas

我们是直接取盖玻片用无水乙醇清洗，然后再过火，直接就铺在孔板里面，接种细胞之前可以用0.1%的明胶处理下。

idealgas

我们是直接取盖玻片用无水乙醇清洗，然后再过火，直接就铺在孔板里面，接种细胞之前可以用0.1%的明胶处理下。

HMC

我们是直接取盖玻片用无水乙醇清洗，然后用PBS洗涤3次，不用过火，直接就铺在孔板里面，接种细胞之前可以用0.1%的明胶处理下。