请问实验室用于做细胞爬片的盖玻片如何进行消毒处理？

lizhen

我的实验是培养骨髓基质干细胞（MSC),传代第三代在6孔培养板培养，我想请问一下 做细胞爬片的盖玻片如何消毒处理，每个孔可以放几块，我想节省试剂和培养基，谢谢

smlyk

1、取干净的盖玻片若干，用洗衣粉轻轻擦洗（注意轻柔，不要留下明显痕迹，方便以后观察细胞）
$ U) E1 p# J3 D9 k$ p2、5％的稀盐酸泡过夜！
* \2 p, L; ^  Z4 K6 N" A5 X3、取出盖玻片后，烘干后，泡酸，过夜！
  j5 x7 W1 x1 T7 e. }4、用自来水反复冲洗！
4 Q% \0 x8 I- V1 X, K: ?5、（我个人认为这一步很重要）将玻片放在水中；先准备一干净饭盒，往里面铺几层纱布；用镊子轻轻将玻片夹至纱布上，每块玻片之间不接触。若干片后再铺纱布，接着再放玻片！, ~, n  S" c7 V5 l
6、高温高压消毒！! _; M* p) k0 w  \$ {
以上是细胞爬片之前玻片的处理，爬片之前用0.1％明胶涂玻片，干后在铺板效果也很好！" _3 y1 J0 D. O/ @- b
一点建议！

wojoo

我的经验是
" p* R/ \9 j' L+ d1、取干净的盖玻片若干，用洗衣粉轻轻擦洗（注意轻柔，不要留下明显痕迹，方便以后观察细胞）( N* N& H" k" i
2、硫酸重铬酸钾过夜
4 f# Y1 Y! v- D( P: V% O& z* F3、取出盖玻片后，用自来水反复冲洗30分钟。
1 D: Z& B9 `! `$ r4 N4、用双蒸水漂洗10分钟。+ F; t! c( [1 e+ F1 Z
5、取出后直接放入100%酒精中（如果没有也可以置入95％的酒精中）过夜后，用镊子夹取出，自然晾干即可用。也可以置于酒精中长期保存，用时取出。
3 x+ @, a- A2 ]6 x6 G本人认为骨髓基质干细胞贴壁能力较强，可以不用明胶包被；由于酒精有消毒作用可以不用高压或者高温。

sailboat

一般可用酒精泡，之后紫外灯照射
0 W9 j" @+ O, [. ^- ?但是还会有水印，这个问题不好解决. I7 a8 D" M! d1 e- X
若是六孔板，每空可放5～6个爬片

王乾

把爬片小心放入板空里面，用PBS洗个几遍，再照一到两个小时紫外就可以，当然有人推荐先用PBS洗，在高温灭菌，我的经验是再怎么洗一凉干总会有水渍，其次照一下紫外就可以达到灭菌的目的，我从来都没污染过。照完紫外，加上明胶或者多聚赖氨酸室温一到两小时，吸掉，PBS洗几遍，然后就可以传细胞了，由于是做细胞亚定位，所以细胞尽量传稀点，这样就可以保证一个视野下尽量有较少的不理想的细胞干扰，一般情况下24孔板的一个孔我铺3万左右的Hela细胞，效果很不错。

conggu

) ?3 h0 u; s8 p6 i6 j" k# e' |" x: m4 k2 v9 N- X% ?
我一般是把拨片跑在无水乙醇中，使用前用酒精灯灼烧，然后放入六孔板中。。。一定要用无水乙醇，用镊子夹，这样才不会有水印。

luoziwei

我都是75%酒精浸泡保存，使用的时候拿出来放在PBS浸泡照紫外过夜，然后多聚赖氨酸处理，风干后加PBS洗，然后置于孔内用培养基润洗一遍，最后吸出培养液种细胞

idealgas

我们是直接取盖玻片用无水乙醇清洗，然后再过火，直接就铺在孔板里面，接种细胞之前可以用0.1%的明胶处理下。

idealgas

我们是直接取盖玻片用无水乙醇清洗，然后再过火，直接就铺在孔板里面，接种细胞之前可以用0.1%的明胶处理下。

HMC

我们是直接取盖玻片用无水乙醇清洗，然后用PBS洗涤3次，不用过火，直接就铺在孔板里面，接种细胞之前可以用0.1%的明胶处理下。