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本帖最后由 泡沫清风 于 2009-8-22 11:01 编辑 1 |; V. s @1 j( C' f r
% L. o% w7 G& G接种质粒48小时,观察细胞并收集病毒:
0 l$ k2 E7 s3 ?. Y9 y! A& k) p; i- M, ^
. P$ h/ V9 p s. E7 E% x1 F/ f" p5 q" D
应该说我的细胞状态还是不错的。一般我48小时收一次病毒,如果细胞状态好,72小时再收一次,当然病毒滴度肯定没有48小时的高。
. K1 k! {: E& o- u4 x$ N+ O# }
- f# ~- z9 k) \8 {收集时,一般可以先2000转离心,再用0.45um的滤器过滤。不过我直接用0.45um过滤,省事。呵呵8 {/ q; O* u) i) \
过滤完病毒上清可以先浓缩。50000g,4℃离心2h。但我一般不浓缩。" p* K7 u; K, `& c8 R& X5 l
如果在2、3天之内要用这批病毒可以放在4℃,如要要在以后用,就分装保存于-80℃。一般冻存一次滴度降1/3到1/2。 |
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