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本帖最后由 泡沫清风 于 2009-8-22 11:01 编辑
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接种质粒48小时,观察细胞并收集病毒:
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* t6 t- {5 k& g# q9 Q4 ^
. r& S/ _% I3 Q, v) |应该说我的细胞状态还是不错的。一般我48小时收一次病毒,如果细胞状态好,72小时再收一次,当然病毒滴度肯定没有48小时的高。7 j7 ~ v+ }; [' |6 q
* v6 C7 M+ ~ M收集时,一般可以先2000转离心,再用0.45um的滤器过滤。不过我直接用0.45um过滤,省事。呵呵1 ~7 w/ a3 X' a5 o2 o. v
过滤完病毒上清可以先浓缩。50000g,4℃离心2h。但我一般不浓缩。
V3 b. T) b( g) w/ U5 P4 j/ ^如果在2、3天之内要用这批病毒可以放在4℃,如要要在以后用,就分装保存于-80℃。一般冻存一次滴度降1/3到1/2。 |
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