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本帖最后由 泡沫清风 于 2009-8-22 11:01 编辑
1 E$ Q9 s3 I+ O7 |- M2 s& v
9 s% x2 |+ {/ R0 @) \3 R接种质粒48小时,观察细胞并收集病毒:
4 _5 R: v" q, Y0 a" r) W
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应该说我的细胞状态还是不错的。一般我48小时收一次病毒,如果细胞状态好,72小时再收一次,当然病毒滴度肯定没有48小时的高。5 e& I4 }1 ?" J. e, V M0 Y0 O
, W' K9 g4 Y9 {- G' _
收集时,一般可以先2000转离心,再用0.45um的滤器过滤。不过我直接用0.45um过滤,省事。呵呵! Y% i4 q. n# a
过滤完病毒上清可以先浓缩。50000g,4℃离心2h。但我一般不浓缩。: i# T0 Z$ X) T! a
如果在2、3天之内要用这批病毒可以放在4℃,如要要在以后用,就分装保存于-80℃。一般冻存一次滴度降1/3到1/2。 |
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