讨论去除PBMC中少量红细胞方法

只因偶然

近期，提取的PBMC中含有少量红细胞，请问大家有什么好的方法去除红细胞，不影响白细胞活性和后续培养的。有好的红细胞裂解液也可以推荐。

王宏伟8901

吸取白膜层的时候尽量慢慢吸取，不要吸到红细胞

翎宝

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  X! t$ R5 j! y8 j; P
5 i. f3 T# y' k0 B用裂解液后期长不起来的，用分离液再离一次试试，或者后期长起来后用注射用水裂解试试

wzs1985

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试一试高渗与低渗的PBS，先用1.8x的PBS处理几分钟，再用等体积的2.2x的PBS中和，然后离心。处理时间以及回收率就需要用你的经验把握了。

rzghc

先hes沉降后ficoll分离

拉二胡的拉尔夫

1.上ficoll是用盐水充分稀释" g+ D# _% z0 `: X9 q& H
2.离心降速时减少震动。
4 Q" H5 j( W/ |% D" l8 Y3.吸白膜层时要轻柔。

剡溪兰客

再上一次ficoll即可

金鹏

如果不是使用适合的分离液，并掌握好恰当的离心力和离心时间等，基本上都会有一点红细胞。要完全去除基本上只有用裂解的方法，裂解液或低渗的方法

只因偶然

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红细胞跟白细胞混一起了

只因偶然

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+ d2 ]& q' W- w8 _2 F所以问是否有好的红细胞裂解液