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讨论去除PBMC中少量红细胞方法     [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2017-7-7 09:49 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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近期,提取的PBMC中含有少量红细胞,请问大家有什么好的方法去除红细胞,不影响白细胞活性和后续培养的。有好的红细胞裂解液也可以推荐。
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沙发
发表于 2017-7-7 10:31 |只看该作者
吸取白膜层的时候尽量慢慢吸取,不要吸到红细胞
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藤椅
发表于 2017-7-7 11:17 |只看该作者
回复 只因偶然 的帖子3 i3 D' u, ~) [, p. o$ r6 O; l

# w( V  ~" J3 A3 Q4 ^6 l用裂解液后期长不起来的,用分离液再离一次试试,或者后期长起来后用注射用水裂解试试
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板凳
发表于 2017-7-7 11:38 |只看该作者
回复 只因偶然 的帖子
4 I1 f+ y2 j- k3 }6 R  l+ L; K3 {' G
( t6 @+ }* N- R" V* m试一试高渗与低渗的PBS,先用1.8x的PBS处理几分钟,再用等体积的2.2x的PBS中和,然后离心。处理时间以及回收率就需要用你的经验把握了。
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报纸
发表于 2017-7-7 13:26 |只看该作者
先hes沉降后ficoll分离
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金话筒 优秀会员

地板
发表于 2017-7-7 14:06 |只看该作者
1.上ficoll是用盐水充分稀释
$ K4 J0 T. l$ y7 @2.离心降速时减少震动。
# H( u4 b' d& S+ d0 l- w0 F3.吸白膜层时要轻柔。
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7楼
发表于 2017-7-7 14:10 |只看该作者
再上一次ficoll即可
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8楼
发表于 2017-7-7 14:28 |只看该作者
如果不是使用适合的分离液,并掌握好恰当的离心力和离心时间等,基本上都会有一点红细胞。要完全去除基本上只有用裂解的方法,裂解液或低渗的方法
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9楼
发表于 2017-7-7 16:25 |只看该作者
回复 王宏伟8901 的帖子
/ Y% V7 t! ~, K8 n. T/ ?( s4 j0 y2 |
8 K$ N" p. ]3 l1 }3 o5 v" W红细胞跟白细胞混一起了
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10楼
发表于 2017-7-7 16:26 |只看该作者
回复 翎宝 的帖子8 ]9 T9 l4 f/ V; E7 E( G
7 Q. C! a  a" Q" {0 c6 s
所以问是否有好的红细胞裂解液
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