讨论去除PBMC中少量红细胞方法

只因偶然

近期，提取的PBMC中含有少量红细胞，请问大家有什么好的方法去除红细胞，不影响白细胞活性和后续培养的。有好的红细胞裂解液也可以推荐。

王宏伟8901

吸取白膜层的时候尽量慢慢吸取，不要吸到红细胞

翎宝

回复 只因偶然 的帖子. K# _/ }0 i- [3 A0 P( D$ \  X# y. c

9 A# |: k5 r/ G* {7 f用裂解液后期长不起来的，用分离液再离一次试试，或者后期长起来后用注射用水裂解试试

wzs1985

回复 只因偶然 的帖子0 f  ]; X, \+ Z. E) k& n

) b# B2 K+ z- F4 e. L( P试一试高渗与低渗的PBS，先用1.8x的PBS处理几分钟，再用等体积的2.2x的PBS中和，然后离心。处理时间以及回收率就需要用你的经验把握了。

rzghc

先hes沉降后ficoll分离

拉二胡的拉尔夫

1.上ficoll是用盐水充分稀释6 f: A% t8 B; w9 z* i
2.离心降速时减少震动。+ T+ X0 u9 Q0 M# V" ~
3.吸白膜层时要轻柔。

剡溪兰客

再上一次ficoll即可

金鹏

如果不是使用适合的分离液，并掌握好恰当的离心力和离心时间等，基本上都会有一点红细胞。要完全去除基本上只有用裂解的方法，裂解液或低渗的方法

只因偶然

回复 王宏伟8901 的帖子- I+ m) v* v1 v5 m- F# ~3 Z2 [
4 R6 S% F# ~" W/ K
红细胞跟白细胞混一起了

只因偶然

回复 翎宝 的帖子3 d7 Y7 ?, R; A" \& U) R
: V; O/ o" }3 c$ i
所以问是否有好的红细胞裂解液