请教一下给为前辈一些关于羊膜干细胞培养的问题，望指教

fenglinzhu

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( a8 ?; S: s7 s9 U* U" P9 x1 y我做过羊膜间充质干细胞的培养，消化法比较容易操作

fenglinzhu

回复 2357710447 的帖子" Y6 c6 M# [  p$ z* q

% X$ K( a- o2 S5 e把羊膜剪成0.2~0.5平方mm的小块置玻璃皿，加10ml0.05%胰酶，搅拌均匀后置37℃消化15分钟后取出搅拌均匀，再消化15分钟。
, G# S7 l, f- r5 p) C200目筛网过滤，并用PBS充分冲洗羊膜组织块。
+ [: S' \( R4 P2 `/ \收集悬液，离心所得的细胞即为包含羊膜间充质干细胞的细胞群体，可直接冻存，也可直接用于培养

fenglinzhu

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8 g+ C8 d# i. s* x( {$ o5 t8 U0 N" O' `0 d
哦，对了，200目筛网过滤之前先用血清终止消化

fenglinzhu

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" s- I5 U. L+ M
会有一定的杂细胞，不管你用什么方法培养都会有一定的杂细胞啊，但杂细胞和间充干贴壁程度不同，贴壁时间不同，在培养基中生长情况不同，培养几代后就比较纯了。每次传代消化的时候那种难消化下来的细胞就放弃，这样可以提高纯度。胰酶能够淹没组织块即可，没有特定要求多少比例消化。100目也可以用啊，就是过滤起来比较慢。终止消化可以用含血清的完全培养基啊，稍微多加点就好了。用50ml离心管不是不可以，只是用50ml离心管可能比较浪费胰酶，不容易完全浸泡到嘛。

fenglinzhu

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