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求助-怎么养MEF细胞 [复制链接]

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楼主
发表于 2009-9-17 14:13 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 Te.L 于 2009-9-17 14:15 编辑
9 v/ [" l; j2 h- ]3 G" [; s6 L" b7 \
我最近在养MEF细胞,但老是养不好,传了3代左右不仅长得慢,而且形态也不好。
& ~2 u5 y/ {. q- o9 g# b" p我用的皿和瓶是greiner的;DMEM高糖培养基+10%进口FBS+双抗。+ s$ ~+ Z+ g* P% `& V
传代是用0.05% Trypsin-EDTA,大概消化3-4min。6 b) U6 B9 J- v2 x- x
现在很是郁闷!急需各位的指点。MEF细胞难养吗?
% E3 h9 D, X/ [: D+ q谢谢!
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沙发
发表于 2009-9-18 09:28 |显示全部帖子
谢谢各位!我的是从协和细胞库购买的第一代,买回来细胞形态都很好。
+ ~& B; @+ Q0 [但我传了一两次后细胞就出现了各种形态,像是张牙舞爪的。消化后正常的应该是均匀的、很圆滑,但我的变成了大小不均、不圆滑了。0 j( m. |2 K5 |3 u7 D
我想请教,你们对培养基和血清有什么要求?还要添加非必须氨基酸和谷氨酰胺吗?) Q+ i1 D( _/ z( Z
能告诉我一些你们养MEF的具体细节吗?    感谢

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藤椅
发表于 2009-9-18 14:17 |显示全部帖子
谢谢楼上!那你们用什么牌子的培养基和血清呢?货号能告诉我吗?

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板凳
发表于 2009-9-18 19:09 |显示全部帖子
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好的!谢谢大家!3 w& j3 z* t$ a" R+ d2 h9 W1 y
我也会自己认真摸索,也非常期待能听到大家更多的意见!

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报纸
发表于 2009-9-19 09:57 |显示全部帖子
大家有用gibco的DMEM高糖培养基养的吗?
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