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Te.L

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楼主

发表于 2009-9-17 14:13 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印

本帖最后由 Te.L 于 2009-9-17 14:15 编辑

我最近在养MEF细胞，但老是养不好，传了3代左右不仅长得慢，而且形态也不好。3 v& @' t/ e! |) q5 D- {$ F
我用的皿和瓶是greiner的；DMEM高糖培养基+10%进口FBS+双抗。
传代是用0.05% Trypsin-EDTA，大概消化3-4min。
现在很是郁闷！急需各位的指点。MEF细胞难养吗？& R( o, a$ [% L5 \7 v1 g
谢谢！

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沙发

发表于 2009-9-18 09:28 |显示全部帖子

谢谢各位！我的是从协和细胞库购买的第一代，买回来细胞形态都很好。/ Q; C L' Y7 G% s* \
但我传了一两次后细胞就出现了各种形态，像是张牙舞爪的。消化后正常的应该是均匀的、很圆滑，但我的变成了大小不均、不圆滑了。9 T! W' G" Q$ c G0 i# `7 n" n& j
我想请教，你们对培养基和血清有什么要求？还要添加非必须氨基酸和谷氨酰胺吗？5 O) m/ F5 T3 J- @
能告诉我一些你们养MEF的具体细节吗？感谢