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[请教] 我的细胞哪里去了   [复制链接]

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楼主
发表于 2017-8-23 18:09 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
间充质干细胞培养,融合率达到70%后,消化传代。消化离心后,细胞不见了,细胞计数为0。但是在传代后半小时又逐渐有细胞出现的培养瓶中,这是怎么回事?

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沙发
发表于 2017-8-23 21:34 |只看该作者
本帖最后由 快来快来数一数 于 2017-8-23 21:35 编辑
1 |$ b7 _5 g3 S
6 j* Z7 b* `1 [, ~- K3 n4 n回复 免疫与细胞 的帖子9 O: V: O  C. a6 u8 z4 T

+ z! g' s! H! [, P离心后要吸出废液,加入培养基吹散使再悬浮,然后计数。你看看是不是忘了吹打了。另外如果密度低,是有可能在计数板的小格看不着细胞的,所以稀释倍数别太大。

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藤椅
发表于 2017-8-23 21:35 |只看该作者
太过稀释了吧?或者是计数仪参数没设定好?

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板凳
发表于 2017-8-24 07:59 |只看该作者
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按多大的比例传代?1:?传的?有可能是传代太稀了
6 P2 L, \# n0 ]: A
: i* C" Y2 f$ R: q

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报纸
发表于 2017-8-24 08:34 |只看该作者
传的太稀了,容易长不起来,对细胞活力也有影响!

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地板
发表于 2017-8-24 09:01 |只看该作者
回复 理科小文艺 的帖子2 T$ k) j# A6 N
- ?# F  w8 ^9 S' v
我还没传代呢,就是消化之后离心收集细胞,重悬进行细胞计数的时候,细胞没了,一会又出来了。

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发表于 2017-8-24 09:13 |只看该作者
你这个问题描述的像悬疑片一样,细胞不见了又出来了,别人回答只能凭空想象。细胞再少计数时总能看到一两个吧,你这个操作是同以前一样,只是这次出现异常?计数是计数仪还是计数板

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发表于 2017-8-24 11:03 |只看该作者
重点检查计数设备有没有问题。

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发表于 2017-8-24 13:13 |只看该作者
回复 免疫与细胞 的帖子
: p  D6 [8 H4 p
# D4 }( p5 A7 |; s, p2 Eok,那你是如何判断你的细胞又出现了呢?你确定自己前后取的样是一个出处?找找自己操作环节的问题吧。: _4 E- Z0 C2 y% m

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发表于 2017-8-24 13:23 |只看该作者
回复 理科小文艺 的帖子! W/ u* D2 J' U, ^

, [! a  h) t  B" @) A: D是这样,我在消化后收集细胞,细胞计数,血球分析仪计数为0,手动计数也没有看到细胞。因此就没有按照细胞数来接种,直接接种到2个培养瓶,显微镜下可以看到培养瓶中悬浮细胞。也有可能是细胞量太少,但是我消化的时候细胞很多,因此很困惑。
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