我的细胞哪里去了

免疫与细胞

间充质干细胞培养，融合率达到70％后，消化传代。消化离心后，细胞不见了，细胞计数为0。但是在传代后半小时又逐渐有细胞出现的培养瓶中，这是怎么回事？

wmch666

你是消化之后就计数的吗？是不是没消化好啊，你看看之前用的培养瓶里还有没有没消化下来的细胞。

2357710447

1  可能是你重悬计数的环节出现问题    重悬细胞要吹散均匀     吹打次数不要太少     4 f4 p5 t9 C6 y9 O# U& R
2  细胞计数仪的问题   参数调整是否正确  操作是否正确
% r$ B: @+ q* N% P- _# o3  取出来计数的细胞时间不要放太长时间（计数时要用吹打几下）   时间太长细胞沉淀    取样取到表面   自然也就看不到

vicky406285822

刚好你计数的那部分没有细胞，应该是你没有混匀，既然一个也没有，这几率得多小呀！

免疫与细胞

; Q$ ]: r, i5 V" u6 t, `3 t* ^  X  Y
回复 淘知路遥 的帖子
) _6 Y$ H! t( ^4 X
! Y3 Y  F- l3 Q" K+ h5 |9 [% Z2 a2 H好的，先谢谢，昨天操作时胰酶消化效果不好，消化了十几分钟，估计这是问题的关键。

淘知路遥

胰酶室温或放37℃预热一下，消化时间控制2-3min

免疫与细胞

回复 随时准备下线 的帖子
. E3 ?6 n$ {! }4 c% Y+ Y. ]" a$ g' s! C; X) F, B9 b/ ^  m2 R
谢谢，我今天再试一次，晚一点向大家报告。我新买了一瓶胰酶

ltickp

你计数时是不是取错样本了，按理来说，计数工具经常用的话，血球计数板即便沉淀没拍散也不至于看不到一个细胞啊，细胞计数仪计数的话，也是有很低的浓度显示的

ltickp

你计数时是不是取错样本了，按理来说，计数工具经常用的话，血球计数板即便沉淀没拍散也不至于看不到一个细胞啊，细胞计数仪计数的话，也是有很低的浓度显示的

理科小文艺

从多大底面积的瓶子中消化的，又是接种到多大底面积的瓶子中，这个比例比较重要。有可能是你消化终止液或者重悬液太多，取出的样本不具有计数意义导致的。只要后期瓶里细胞密度ok就行，太稀了容易长差。8 l4 Z! m0 N3 c7 r6 h# x