求助：SD大鼠神经干细胞流式检测！！

huangzhenbo131

回复 1# xialiguang ! v5 J5 C$ r% a8 c; P; x4 y* m2 |4 \  H
谢谢你的问题，这方面的实验做的不多，不过可以提一些意见供你参考。6 u2 d: f* d% ?2 x0 t& T
1.首先你做的是FASC检测，而不是FASC分选，所以流式参数要求不是非常严格，可以参照人血液标本，或稍加改变。5 X+ V6 e* q0 P8 t; t; P. ?' ^
2.SD大鼠的神经干细胞是否比常规一般的人血液中的淋巴细胞要小？这个不是很清楚，只知道干细胞一般核质比都比一般的细胞要大。但我想神经干细胞与淋巴细胞不会有几十倍的大小差异，所以对流式影响应该不会很大。& ~' o' w) U$ L: E
3.关于细胞碎片的问题，看你的神经干细胞是贴壁培养还是以神经球的方式悬浮培养，在消化时控制一下胰酶的浓度和消化时间，离心的时候条件也不要太剧烈，以免压碎细胞，其实这些也是一般细胞制作单细胞悬液时应该注意的，这方面的技术问题，你可以参考一些FACS的操作规程注意事项。* g6 J" N  C+ q# X5 M" w) ]- M# B
说了这么多，好像也没帮上什么忙，关键你可以做一下预实验，FACS的技术参数的问题你可以问常做FACS的操作人员。