干细胞培养与消化

zxb1105453899

之前用完全培养基培养脐带间充质干细胞后，用胰酶进行消化过后发现细胞会粘成一团，吹打不散，是什么原因？

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1.首先细胞培养培养时间过长，细胞呈现层状覆盖，消化的时候如果控制不好时间，等待细胞完全变圆脱落，那么细胞就是结团成絮状，不易吹散；
( X+ F: r3 R  L9 U+ g2.其次消化的时候时间不要太长，用手轻拍瓶壁，使细胞逐层脱落，不要这样不至于结团难以吹散，即使有絮状，用移液枪也能吹散；
8 S# X) {2 W& Z( I+ }( \" B3.再次次一点就是倒出培养上清时，用生理盐水冲洗两遍，细胞分泌的物质黏连在表面，消化的时候细胞结团黏连不易吹散；) S: \* u7 O0 u
4.最后就是用移液枪吹离心管底部的细胞时，液体体积不超过5ml，这样吹力较大，容易吹散，待吹散后再加入自己需要量体积的液体混匀即可。  " k' U: v! Y, Q$ |1 s$ D* F
希望对你有用！

zxb1105453899

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9 B2 W+ O1 G' F! w, W& n非常感谢你的解答

cxs

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9 Q' O; a: ?+ }9 L$ h, g) g$ A7 F
2 W6 H- P. J6 `/ K) R5 K" M这位朋友，请问为何“等到细胞完全变圆脱落”反而会结团呢？有点不太理解

2357710447

回复 cxs 的帖子8 O% o/ G- P- n& u( B$ O! i
) B3 m+ A7 G) |/ ]1 v( t4 [8 }  ?: U
1.细胞并不是一个一个脱落，一片一片的1 y+ M, F7 q0 R, A. `
2.密度过大，细胞相互之间也有一定的吸附作用9 K" o7 }8 e4 n) _
3.如果在细胞层叠时，不用盐水冲洗表面的分泌物，粘稠度很高，结团率极高