干细胞培养与消化

zxb1105453899

之前用完全培养基培养脐带间充质干细胞后，用胰酶进行消化过后发现细胞会粘成一团，吹打不散，是什么原因？

2357710447

1.首先细胞培养培养时间过长，细胞呈现层状覆盖，消化的时候如果控制不好时间，等待细胞完全变圆脱落，那么细胞就是结团成絮状，不易吹散；
0 w5 W  w- \6 c% M8 w# s) d) ]2.其次消化的时候时间不要太长，用手轻拍瓶壁，使细胞逐层脱落，不要这样不至于结团难以吹散，即使有絮状，用移液枪也能吹散；
. ~6 l3 _0 I5 F$ |3.再次次一点就是倒出培养上清时，用生理盐水冲洗两遍，细胞分泌的物质黏连在表面，消化的时候细胞结团黏连不易吹散；
1 I& J1 Z1 C0 Q+ r/ M: N0 C4.最后就是用移液枪吹离心管底部的细胞时，液体体积不超过5ml，这样吹力较大，容易吹散，待吹散后再加入自己需要量体积的液体混匀即可。  
4 f" n2 @0 ?4 g6 J希望对你有用！

zxb1105453899

回复 2357710447 的帖子0 q" G! {. ^3 R( K1 N9 n$ G) z
- \+ S, O" x. f# R. s' J7 }
非常感谢你的解答

cxs

回复 2357710447 的帖子
- j' S" p/ J) B0 w( {& _
! N/ b1 v& O- f) E, j这位朋友，请问为何“等到细胞完全变圆脱落”反而会结团呢？有点不太理解

2357710447

回复 cxs 的帖子
9 p1 T. u9 g$ g+ x# o7 x8 B' I. }8 }
, @: o0 y, f& r1.细胞并不是一个一个脱落，一片一片的
& M$ t. f2 t/ T! p: y" m- F2.密度过大，细胞相互之间也有一定的吸附作用4 I( N) W- `. H0 {7 I3 [/ @2 b
3.如果在细胞层叠时，不用盐水冲洗表面的分泌物，粘稠度很高，结团率极高