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293细胞是转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞系，293T细胞由293细胞派生，同时表达SV40大T抗原，含有SV40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。用Ca3(PO4)2转染效率可高达50%。蛋白表达水平高，转染后2-3天用碱性磷酸酶分析可较容易地检测到表达的蛋白。瞬时转染293T细胞是过表达蛋白并获得细胞内及细胞外（分泌的或膜）蛋白的便捷方式。
1 O, u1 x: ?) W" J" u) _. R& r- n/ ^
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: n& d0 `$ s- s, K, q0 \) w
其生长特性为：
- i0 `( c, G" [0 U- e3 X粘附# r2 j! ]+ [9 b; v% y4 O' m
文献评价 293细胞系是原代人胚肾细胞转染5型腺病毒(Ad 5) DNA的永生化细胞。[RF32725]
; A! n3 Z1 B1 s, U3 u 表达转染的腺病毒5的基因。[RF32725]/ @! a" `% L) h- {+ J% Y
早期报道认为此细胞含有Ad 5基因组左端和右端[RF32764]，现已清楚仅含有左端序列。[RF50113]
: p+ L8 _1 X D 此细胞系人腺病毒滴度高。. j0 E# h& P6 M' e
室温不贴壁，37℃几日后重新贴壁。
6 M7 b$ E6 o% i5 u- C5 h7 K6 U 表达由整合素beta-1 亚基与玻基结合素受体 alpha-v 亚基组成的玻基结合素细胞表面受体. [RF33793], K- I( f; ]% N! P' `* B* s
The Ad5 insert was cloned and sequenced, and it was determined that a colinear seqment from nts 1 to 4344 is integrated into chromosome 19 (19q13.2).
# J+ Z6 h+ r* M0 v' g( A 传代 293:弃培养基，含0.25% 胰酶, 0.03% EDTA 消化液洗涤，弃去，加1-2ml消化液室温或37℃消化。
( n& r9 B7 v0 ]3 E/ M 加入新鲜培养基，吸出，分到新培养皿中。一传二至一传四。$ h. |8 j( i' @8 A" E9 ^
293T:生长快，通常倍增时间不到一天 。每3~4 天1：10至1：20稀释，5% CO2条件下培养。细胞贴壁疏松，可只用EDTA消化，不要用胰蛋白酶过度消化。
& P6 w& D7 B" W4 Y( t 培养基更换 每2-3天一次( T5 G) F8 v) N7 A
冻存液 95%培养基；5%,DMSO；culture medium 95%; DMSO, 5%；
8 r( K, e; T- u& D. {) E( H 培养条件 ATCC培养基：90%的MEM Eagle，加入2mM L-谷氨酰胺，1.5g/L碳酸氢钠，0.1 mM必需氨基酸，1.0 mM 丙酮酸钠；10%加热灭活的马血清4 W" G l, O. N* ?; J; u6 o
37℃培养 |
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发表于 2010-1-24 21:49
发表于 2010-1-24 22:36
